LC-MS_MS法定量分析人血清中多黏菌素B的浓度.pdfVIP

1380ChinJPhaVol.32.No.12

论著次研究

LC-MS/MS法定量分析人血清中

多黏菌素B的浓度

张柳，刘亮，吴建华，吴东方

武汉大学中南医院药学部（武汉430071）

【摘要】目的开发一种简单灵敏的液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）用于人血清中

多黏菌素B（PB）的浓度测定。方法用多黏菌素E，（PE，）作为内标，使用乙腈（含0.1%甲酸）

沉淀蛋白质法处理样品。采用HypersilGOLDTMCis色谱柱进行色谱分析。流动相A为0.1%

甲酸-水，流动相B为纯甲醇，梯度洗脱；流速：0.4mL·min，进样量：2μL，分析时间：

3.3min，柱温：40℃。采用多反应监测模式，电喷雾离子源正离子模式进行定量分析。定

量离子对分别为mlz402.10101.10（PB,），m/z397.45101.10（PB,），ml/z578.50

101.10（PE，）。结果人血清中PB在22~15000ngmL-l，PB,在5~1700ngmL-范围

内线性关系良好，相关系数均大于0.9990。PB，和PBz的定量下限分别为22，5ng·mL-l。

PB，的准确度为95.98%~104.60%，PB，的准确度为98.11%~105.59%；批内和批间精密度的

RSD均小于15%。PB，和PB，的提取回收率分别为97.26%~103.31%和95.81%~101.22%；

基质效应分别为96.52%~109.54%和93.29%~109.95%。样品稳定性试验的RSD均小于

15%。应用本方法测定的6例患者平均AUCo-24h为（72.85±17.87）mg·h·L-l。结论建

立的测定人血清中PB浓度的LC-MS/MS方法符合生物样本检测分析的要求，适用于临床

上PB血药浓度检测

【关键词】多黏菌素B；液相色谱串联质谱法；血药浓度

QuantitativeanalysisofpolymyxinBinhumanserumbyLC-MS/MS

LiuZHANG,LiangLIU,Jian-HuaWU,Dong-FangWU

DepartmentofPharmacy,ZhongnanHospitalofWuhanUniversity,Wuhan430071,China

Correspondingauthor:Dong-FangWU,Email:dfwu2010@

[Abstract]ObjectiveTodevelopasimpleandsensitiveLC-MS/MSmethodfor

thedeterminationofpolymyxinBinhumanserum.MethodsPolymyxinE,wasusedas

aninternalstandardandacetonitrile(0.1%formicacid)wasusedforproteinprecipitation.

ChromatographicseparationwasperformedonaHypersilGOLDTMCiscolumn.Mobile

phaseAwas0.1%formicacidinwater,andmobilephaseBwasmethanol.Theflowratewas

0.4mL-min,withgradientelution.Thecolumntemperaturewas40°C.Theinjectionvolume

was2μLandtheanalysistimewas3.3min.Multiplereactionmonitoringandelectrospray

ionsourcepositiveionmodewereappliedforquantitativeanalysis.Thequantitative

analysisionpairswerem/z402.10101.10(polymyxinB,),m/z397.4510