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临床生化检验技术

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技术概论

技术概论

检验方法体系

常见指标检测

质量控制标准

临床应用实践

发展趋势展望

01

技术概论

PART

肝功能相关指标

ALP(碱性磷酸酶)

胆汁淤积时明显升高,骨骼疾病(如佝偻病)或妊娠期也可出现生理性增高。

03

分布于肝脏和心肌,AST/ALT比值有助于鉴别肝硬化(2)与急性肝炎(1)。

02

AST(天门冬氨酸氨基转移酶)

ALT(丙氨酸氨基转移酶)

特异性反映肝细胞损伤,显著升高见于病毒性肝炎、药物性肝毒性,轻度升高可能与脂肪肝相关。

01

蛋白质代谢指标

01

血清总蛋白

降低提示慢性消耗性疾病(如结核、恶性肿瘤)或合成障碍(肝硬化),增高见于脱水或浆细胞病(多发性骨髓瘤)。

02

血清白蛋白

半衰期长(约20天),低白蛋白血症与肝硬化、肾病综合征的预后密切相关,需结合球蛋白水平分析。

其他关键指标

电解质平衡

血钠、钾异常可导致心律失常或神经肌肉功能障碍,常见于肾功能不全或内分泌紊乱。

糖代谢指标

空腹血糖与糖化血红蛋白(HbA1c)联合用于糖尿病诊断及长期血糖控制评估。

02

检验方法体系

PART

光谱分析技术

发射光谱分析法

通过测量物质受激发后发射的特征光谱波长及强度,进行元素定性和定量分析。广泛应用于金属离子检测,具有灵敏度高(可达ppm级)、多元素同时分析的特点,但需注意基体效应和光谱干扰的校正。

吸收光谱分析法

基于物质对特定波长光的吸收特性建立的分析方法,包括紫外-可见分光光度法(用于蛋白质、核酸定量)和原子吸收法(专属性强,适用于血铅、血钙等微量元素检测)。需严格控制比色皿匹配性和背景吸收干扰。

分子荧光光谱法

利用某些物质受激后发射荧光的特性进行分析,较吸收光谱法灵敏度提高2-3个数量级,适用于维生素B2、叶啉类物质检测,但易受温度、pH等环境因素影响。

红外光谱技术

通过分子振动-转动能级跃迁产生的特征吸收峰进行结构分析,是鉴别有机化合物官能团的金标准,在药物纯度检验和代谢产物研究中具有不可替代的作用。

采用高压输液系统和高性能固定相,可分离热不稳定、高沸点化合物,广泛应用于血药浓度监测(如环孢素、他克莫司)和激素分析。需优化流动相比例、柱温等参数以提高分离度。

高效液相色谱(HPLC)

专门用于无机阴离子(Cl-、NO3-等)和有机酸的分离检测,在电解质紊乱诊断中发挥重要作用。采用抑制型电导检测器时需注意系统平衡时间和淋洗液纯度。

离子色谱法

适用于挥发性、半挥发性小分子化合物的分离分析,如血液酒精检测和脂肪酸分析,配备FID检测器时检测限可达ng级。但样品前处理复杂,常需衍生化步骤。

气相色谱(GC)

01

03

02

色谱分离技术

基于生物分子间特异性相互作用(如抗原-抗体)进行分离,在糖化血红蛋白(HbA1c)检测中具有高选择性,但配基固定化过程和柱再生条件需严格优化。

亲和色谱技术

04

酶学检测技术

酶活性测定法

通过测定酶促反应速率(单位时间内底物消耗或产物生成量)评估酶活性,如ALT、AST检测采用动力学法(监测NADH在340nm吸光度变化)。需严格控制反应温度(±0.1℃)和底物饱和浓度。

01

同工酶分析

利用电泳或色谱技术分离结构差异的同工酶(如CK-MM、CK-MB、CK-BB),对心肌梗死和肌病鉴别诊断至关重要。等电聚焦电泳可达到0.01pH单位的分辨率。

02

酶联免疫吸附试验(ELISA)

将酶标记技术与抗原-抗体反应结合,实现超微量物质(如肿瘤标志物CA125)检测,灵敏度可达pg/mL级。需注意钩状效应(Hookeffect)的识别和消除。

03

酶循环放大技术

通过底物-辅酶的循环反应显著提高检测灵敏度,如用于血清胆汁酸测定的3α-HSD-NAD+循环系统,可使检测限降低至pmol水平,但需精确控制循环次数防止信号饱和。

04

03

常见指标检测

PART

血糖与血脂项目

通过测定血液中葡萄糖浓度评估糖代谢状态,是糖尿病筛查和管理的核心指标,需严格遵循采血前禁食要求以保证结果准确性。

反映长期血糖控制水平,不受短期饮食影响,用于评估糖尿病患者治疗方案的有效性及并发症风险预测。

直接关联动脉粥样硬化风险,需结合高密度脂蛋白(HDL-C)和甘油三酯水平综合评估心血管疾病风险分层。

通过分析载脂蛋白比例揭示脂质代谢异常机制,比传统血脂四项更能精准预测冠心病及脑血管病变风险。

空腹血糖检测

空腹血糖检测

空腹血糖检测

空腹血糖检测

肝功能生化指标

谷丙转氨酶(ALT)与谷草转氨酶(AST)

敏感反映肝细胞损伤程度,ALT特异性更高,AST升高需结合肌酸激酶排除心肌或骨骼肌病变干扰。

总胆红素与直接胆红素

用于鉴别溶血性、肝细胞性和梗阻性黄疸,直接胆红素占比超过50%提示胆汁排泄障碍可能。

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