血清学初筛RhD阴性及D变异人群的分子生物学分析.pdfVIP

2025

5年临床血液学杂志

38卷6期JClinHematol(China)443

血清学初筛RhD阴性及D变异人群的

分子生物学分析*

魏海潮！高丹1郑伟！

［摘要］目的：探讨血清学结合分子生物学在鉴定RhD阴性及D变异血型中的重要意义。方法：采用盐水

法对医院2021年5月一2023年12月的54380例标本进行RhD初筛；采用间接抗人球蛋白试验对初筛阴性的

标本进行阴性确认和抗体筛选；采用抗C、抗E标准试剂进行C、E抗原检测；采用吸收放散试验筛选DEL型；采

用聚合酶链式反应-序列特异性引物（PCR-SSP)方法进行RHD基因分型，并对其10个外显子序列进行扩增；采

用Sanger法对血清学与PCR-SSP结果不一致或基因扩增格局特殊的标本进行测序。结果：在54380例标本中

检出251例RhD阴性标本及3例弱D(IgM抗-D3十）标本，经阴性确认IgG抗-D阳性12例，占初筛阴性样本

的4.78%；抗筛阳性4例，经鉴定均为抗-D。254例标本可划分为8种表型，以cde表型最多，占比59.84%（152/

254）；其次是Cde，占比27.95%（71/254）；cDe最少见，仅有1例。吸收放散试验共筛选出39例DEL变异型，占

初筛阴性样本的15.35%；其中38例为CDe表型，1例为cDe表型。分子生物学试验结果显示，254例标本中，仅

178例完全缺失RHD基因，占比70.08%；剩余76例中共检测出9种RHD变异类型。其中最常见的为RHD*

DEL1（c.1227GA），发生频率约为0.07%（40/54380）；其次为RHD-CE（2-9）-D，发生频率约为0.03%（18/

54380）。DVItype3和weakDtype15为该人群第三常见的基因型，发生频率约为0.01%。另外还发现2例

RHD*711DELC基因型和3种罕见RHD基因类型：RHD-CE（2-7)-D、WeakDtype1（c.809TG）和RHD*

970del3，976del16，均只有1例。本研究还发现了2例RHD*01/RHD*01N.01杂合型，其中1例血清学为弱D，

经测序在其第8内含子上的1154-31位点发生了TC的突变，该突变并未被国际输血学会数据库收录，其血清

学意义不明。而另1例的血清学为阴性，经RHD外显子测序并未发现相应的突变，具体机制有待进一步研究。

结论：本研究通过血清学与分子生物学联用的方法，检测出研究人群独特的RHD基因类型，进一步丰富了沈阳地

区的RHD等位基因库，在准确鉴定血型、保障患者输血安全方面具有重要意义，有利于提高临床精准输血管理

水平。

［关键词］血清学；分子生物学;RhD阴性;D变异；RHD基因；安全输血

D0l:10.13201/j.issn.1004-2806.2025.06.005

[中图分类号］R457.1[文献标志码］A

Molecularbiologicalanalysisofserologicalpreliminaryscreening

RhDnegativepopulationandDvariantpopulation

WEIHaichaoGAODanZHENGWei

(DepartmentofBloodTransfusion,GeneralHospitalofNorthernTheaterCommand

Shenyang,110015,China)

Correspondingauthor:ZHENGWei,E-mail:zhengweidr@163.com

AbstractObjective:Toexplorethesignificanceofserologycombinedwith