生物制药生产工艺流程考核试卷及答案.docxVIP

生物制药生产工艺流程考核试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下哪种方法是生物制药中常用的菌种保藏方法，可长期保持菌种活性且变异率低？

A.斜面低温保藏法（4℃）

B.甘油冷冻保藏法（20℃）

C.液氮超低温保藏法（196℃）

D.沙土管保藏法

2.发酵培养基中添加的“消泡剂”主要作用是：

A.调节pH值

B.抑制杂菌生长

C.降低泡沫表面张力，防止溢出

D.提供碳源

3.高压蒸汽灭菌的标准条件是：

A.100℃，30分钟

B.115℃，15分钟

C.121℃，1520分钟

D.135℃，5分钟

4.以下哪种分离技术基于分子大小差异实现目标产物纯化？

A.离子交换色谱

B.凝胶过滤色谱（分子筛）

C.亲和色谱

D.疏水相互作用色谱

5.单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞的筛选通常使用：

A.HAT培养基

B.高糖培养基

C.LB培养基

D.麦康凯培养基

6.病毒类疫苗生产中，“灭活”步骤的核心目的是：

A.提高病毒感染力

B.破坏病毒核酸或蛋白质，消除致病性但保留抗原性

C.增加病毒数量

D.促进病毒变异

7.生物反应器中“溶氧（DO）”的控制通常通过调节以下哪项参数实现？

A.搅拌转速与通气量

B.培养基pH

C.接种量

D.发酵温度

8.基因工程药物生产中，“包涵体”的形成主要是由于：

A.目标蛋白在原核表达系统中过度表达导致折叠错误

B.培养基营养不足

C.发酵温度过高

D.杂菌污染

9.以下哪种制剂工艺属于“无菌制剂”范畴？

A.片剂压片

B.冻干粉针剂分装

C.颗粒剂干燥

D.胶囊填充

10.生物制品质量控制中，“内毒素检测”常用的方法是：

A.兔热原试验

B.鲎试剂法（LAL法）

C.无菌检查法

D.效价测定法

二、填空题（每空1分，共20分）

1.生物制药上游工艺的核心环节包括菌种选育与保藏、培养基制备、__________和发酵过程控制。

2.发酵罐的关键参数监测通常包括温度、pH、溶氧（DO）、__________（至少2项）。

3.离心分离技术中，“差速离心”主要用于分离__________不同的颗粒，而“密度梯度离心”则基于__________差异实现分离。

4.单克隆抗体制备的“细胞融合”步骤中，常用的促融剂是__________（化学法）或__________（物理法）。

5.病毒类疫苗生产中，“收获”病毒的方式取决于病毒的增殖特性：若病毒以出芽方式释放，需收集__________；若病毒裂解宿主细胞释放，需收集__________。

6.基因工程药物的下游纯化工艺通常包括粗纯（如离心、过滤）、中间纯化（如__________）和精纯化（如__________）三个阶段。

7.无菌制剂生产中，“A级洁净区”要求空气洁净度达到ISO__________级标准，需采用__________（如层流罩）维持环境。

8.生物制品稳定性试验包括加速稳定性试验（通常条件为__________）和长期稳定性试验（通常条件为__________）。

9.发酵染菌的常见原因包括培养基灭菌不彻底、__________（至少2项）。

三、简答题（每题8分，共40分）

1.简述生物制药中“种子扩大培养”的目的及关键控制要点。

2.比较“分批发酵”“补料分批发酵”和“连续发酵”的优缺点，并说明各自适用场景。

3.以重组人胰岛素生产为例，简述从工程菌发酵到最终制剂成型的主要工艺流程。

4.列举三种常用的蛋白质纯化技术（需说明原理），并分析其在不同纯化阶段的应用。

5.阐述生物制药生产中“无菌保证”的核心策略（至少包括设备、工艺、环境三方面）。

四、综合分析题（20分）

某生物制药企业生产重组人粒细胞刺激因子（rhGCSF），发酵过程中出现以下异常现象：

发酵24小时后，溶氧（DO）从40%骤降至10%，且持续无法回升；

发酵液pH从7.0快速上升至8.5；

菌体密度（OD600）仅为正常批次的50%。

请结合生物制药生产知识，分析可能的原因（至少4项），并提出对应的解决措施。

答案

一、单项选择题

1.C（液氮超低温保藏法可长期保藏，变异率低）

2.C（消泡剂降低泡沫表面张力）

3.C（标准条件为121℃，1520分钟）

4.B（凝胶过滤基于分子大小）

5