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等风来等花开等相遇第一章发酵工程
一、培养基1.概念:人们为满足微生物???或积累代谢产物的需求而配
制的混合养料。注意无菌条件。2.成分1)为微生物提供水、无机盐、??、氮源和生长因子等营养物质。壹、微生物的培养需要适宜的条件生长繁殖?碳源??
2)需满足微生物生长时考虑水、无机盐、碳源、氮源、pH????、温度以及O2等的需求。拓展:(1)培养细菌时,一般需要将培养基调至中性偏碱;培养霉菌时,一般需要将培养基调至中性偏酸。(2)“细菌喜荤,霉菌喜素”,是说细菌培养基要含有较高的有机氮,常用蛋白胨和酵母提取物等来配制;霉菌培养基一般用可溶性淀粉加无机物配制,或用添加蔗糖的豆芽汁等配制。(3)培养酵母菌:马铃薯蔗糖培养基。
3.类型及应用1)根据培养基物理性质?
2)根据培养基功能3)根据培养基化学成分:合成培养基、天然培养基等。成分:合成培养基(化学成分清楚)、天然培养基(便宜)注意:菌种保存:斜面培养基,4℃冰箱(零上低温)。
1.消毒1)概念:使用较为温和的物理、化学或生物????等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。二、无菌技术——消毒和灭菌2.灭菌1)概念:使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物????,包括芽孢和孢子。
常见方法适用范围湿热灭菌培养基等(高压蒸汽灭菌的效果最好)干热灭菌玻璃器皿、金属用具等耐高温的和需保持干燥的物品灼烧灭菌微生物的接种工具(如涂布器、接种环等)
拓展:(1)使用高压灭菌锅灭菌时所需的温度、压力和时间是根据要消灭的微生物芽孢等结构的耐热性来确定的。例如,热解糖梭菌的细胞在50℃下经短时间即被杀死,而它的芽孢在132℃下约5min后再置于适宜的条件下还有10%可能萌发。(2)采用已在121℃下高压蒸汽灭菌的、孔径最小的G6玻璃砂漏斗对尿素、葡萄糖等进行过滤除菌后,再在超净工作台内添加到培养基中。对含葡萄糖的培养基,也可采用适当降低温度、压力(112℃,500g/cm2)以及延长时间(30min)的高压灭菌方法灭菌。(3)在全部培养工作结束后,所有使用过的器皿、废弃物等都必须先经过高压灭菌后再洗涤或倾倒。
1.原理:通过一个细胞分裂形成的、肉眼可见的、有一定形态的子细胞集团,称为单菌落????。2.方法:平板划线法和稀释涂布平板法。划线的过程就是对菌种进行分散的过程,在尾部得到单菌落。三、微生物的纯培养
拓展:(1)通常最后一次划线已经可将酵母菌稀释成单个细胞,如果与第一次划线相连,则增加了酵母菌数目,可能得不到单菌落。(2)区别以下不同阶段灼烧接种环的目的1.取菌液前:杀死接种环上原有的微生物。2.每次划线之前:杀死上次划线后接种环上残留的菌种.3.划线结束后:及时杀死接种环上残存的菌种,避免菌种污染。
2)稀释涂布平板法将菌液进行梯度稀释。
1.微生物的选择培养微生物筛选原理:人为提供有利于目的菌????生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长,利用的是选择培养基。2.能分解尿素的微生物的分离与计数1)实验原理①能分解尿素的微生物可以合成脲酶,脲酶能催化尿素分解为微生物生长的?氮源????。②以尿素????为唯一氮源的培养基可从土壤中分离出分解尿素的微生物。四、微生物的选择培养、鉴定和计数
易错:选择培养基和鉴别培养基常用鉴别微生物的方法归纳:(1)菌落特征鉴别法:根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形
状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别。(2)指示剂鉴别法:如以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种微生物后,若指示剂变红,说明该种微生物能够分解尿素。(3)染色鉴别法:透明圈或抑菌圈
四、稀释涂布平板法和显微镜计数法可测定微生物数量比较项目稀释涂布平板法显微镜计数法原理减小样品的稀释度,保证在培养基表面生长单菌落,相同稀释度下多组实验。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌利用血细胞计数板,显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量公式每克样品中的菌落数=C/V×M。C:某稀释度下至少三个平板的平均菌落数,V:涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M:稀释倍数每毫升原液所含细菌数:每小格内平均细菌数×400×104×稀释倍数缺点当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落不区分细胞死活结果比实际值偏小比实际值偏大
一、传统发酵指人们经过微生物发酵后制成所需要的产物的地过程。五、发酵工程为人类提供多种生物产品
2.菌种:来自原材料中天然存在的微生物,或前面保存下来的发酵物中的微生物。3.不同发酵制品风味产生的原因:传统发酵菌种中微生物的种类、代谢特点、种间关系等
发酵工程利用现代工程技术及微生物的特定功能,工业化生产人类所需产品
选育高产、优质的菌种是发
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