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第一章血液一般检验;绪论;二、临床检验在医学中的作用
;2、为分析病情、观察疗效、判断预后提供依据;三、临床检验的一般方法;四、学习临床检验的目的和要求;2、静脉采血法;;两种采血方法的优缺点比较;常用血液标本抗凝剂
及其使用选择;2.草酸钠(乙二酸的钠盐);3.双草酸盐抗凝剂;4.肝素(含硫酸基团的粘多糖);优点:抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易
溶血、能耐高温。;5.乙二胺四乙酸(EDTA)盐;物理方法抗凝:
脱纤维蛋白:
将血液注入有玻璃珠的器皿中,转动,纤维
蛋白缠绕凝固于玻璃球,从而防止血成凝块。适
用于免疫学检验和红斑性狼疮细胞检查。;血涂片的制备技术;;;;细胞染色技术
;碱性染料:为阳离子染料,能接受质子,染细胞核
的染料。如亚甲蓝、天青。;(二)、细胞染色原理:一般以它们的物理现象和/或化学
现象为依据;b.蛋白质的化学性质:蛋白质中的氨基酸含有不同
数量的氨基(-NH2)和羧基(-COOH),同时还有其
他活性基团。在游离状态时,-NH2获得一个H+变成带
正电的-NH3+,而-COOH失去一个H+变成带负电的-COO-。
分别与不同染料结合。;(三)、细胞染色法的类型
1.普通染色法:经物理和/或化学作用的吸附、结合
2.荧光染色法:荧光染料,荧光显微镜
3.细胞活体染色法:活体染料如灿烂甲酚蓝等
4.细胞化学染色法:用化学反应显示细胞内某种成分。
细胞免疫化学染色法(应用单克隆抗体技术、酶标记技术)
;瑞氏染色法;(二)、试剂
1.Wright染液瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml
甲醇:有强大的脱水力,可将细胞固定为一定
形态,并使蛋白质沉淀为颗粒状、网状等结构,增
加细胞与染料接触表面积,提高对染料的吸附作用,
增强染色效果。;染色方法:
a.用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。
b.加瑞氏染液覆盖血膜,固定1min。
c.滴加等量或稍多的缓冲液,混匀,染色5-10
分钟。
d.用清水冲洗??待干后镜检。;注意事项:
a.血膜要干透后才能染色,否则染色时易脱落
b.染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关,
一般染液淡、染色时间长些效果好。
c.染液不能过少,以防蒸发沉淀。
d.冲洗时不能先倒掉染液,应以流水冲,防染料
沉着。冲洗时间也不能长。
e.染色过淡,可复染。
f.染色过深可用水冲洗或浸泡,还可用甲醇脱色;;六、姬姆萨染色法;七、巴氏染色法;显微镜细胞计数法;计数板;细胞计数注意事项;计数误差;固有误差
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