小桐子植物特异性酪蛋白激酶PS-CK1-5基因的克隆及原核表达分析.pdfVIP

热带亚热带植物学报2024,32(1):93~100

JournalofTropicalandSubtropicalBotany

小桐子植物特异性酪蛋白激酶PS-CK1-5基因的克

隆及原核表达分析

王海波,吴贞莹,郭俊云

(曲靖师范学院生物资源与食品工程学院,云南曲靖655011)

摘要：酪蛋白激酶(caseinkinase,CK)作为一类普遍存在的Ser/Thr蛋白激酶，通过调节靶标蛋白的活性与稳定性，在植物整

个生理过程及信号转导途径中发挥重要作用。基于同源序列比对，该研究对小桐子(Jatrophacurcas)酪蛋白激酶基因家族进

行鉴定与表达分析。结果表明，小桐子基因组中共鉴定到7个酪蛋白激酶1基因(CK1)、5个植物特异性酪蛋白激酶1基因

(PS-CK1)、3个酪蛋白激酶2α亚基基因(CK2-α)、2个酪蛋白激酶2β亚基基因(CK2-β)，4个亚家族成员在氨基酸长度、等电

点及外显子数目等都有其家族特异性。蛋白的氨基酸序列比对表明，小桐子酪蛋白激酶1都包含N端保守激酶结构域，同

时其内部都鉴定到典型的激酶活性环基序、ATP结合核心基序、核定位信号肽。qRT-PCR表达分析表明，小桐子JcPS-CK1-5

基因在叶片与根中都属于低温诱导基因，可能参与小桐子抗冷性过程。构建其原核表达载体pET-32a-JcPS-CK1-5，并在

BL21(DE3)中诱导表达，得到81.6kD的条带，与理论融合蛋白的分子量一致。这可为小桐子CK基因的功能鉴定及逆境信

号转导机制研究提供参考。

关键词：小桐子；基因家族；酪蛋白激酶；基因克隆；原核表达

doi:10.11926/jtsb.4719

CloningandProkaryoticExpressionofPlant-specificCaseinKinaseGene

PS-CK1-5fromJatrophacurcas

WANGHaibo,WUZhenying,GUOJunyun

(CollegeofBiologicalResourceandFoodEngineering,QujingNormalUniversity,Qujing655011,Yunnan,China)

Abstract:Caseinkinase(CK),aubiquitousSer/Thrproteinkinase,playsanimportantroleinthewhole

physiologicalprocessandsignaltransductionpathwayofplantsthroughregulatingactivityandstabilityoftarget

protein.TheCKgenefamilyinJatrophacurcaswasidentifiedfromJ.curcasgenomebasedontheBLAST

method.TheresultsshowedthatatotalofsevenCK1s,fivePS-CK1s,threeCK2-αs,andtwoCK2-βswere

identifiedfromJ.curcasgenome,andthefoursubfamilymembersownedfamily-specificityinaminoacidlength,

isoelectricalpoint,andexonnumber.DomainandmotifanalysisrevealedthatallofCK1containN-terminal

conservedkinasedomain,andthekinaseactivationloop(A-loop),ATP-bindingcoremotif,andnuclear

localizationsignalpeptide(