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临床分离金黄色葡萄球菌生物膜形成特性及相关基因解析

一、引言

1.1研究背景与意义

金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）作为一种常见且危害严重的病原菌，广泛存在于自然环境以及人体的皮肤、鼻腔、口腔等部位。在适宜条件下，它会引发多种感染性疾病，小到皮肤软组织的局部化脓感染，大到威胁生命的肺炎、心内膜炎、败血症等严重全身感染，给人类健康带来极大威胁。

随着医疗技术的发展，临床上各种侵入性操作，如留置导尿管、中心静脉导管、人工关节置换等日益增多，这些操作在为患者治疗疾病的同时，也为金黄色葡萄球菌提供了粘附和感染的机会。当金黄色葡萄球菌附着在医疗器械表面或机体组织表面时，能够形成一种特殊的结构——生物膜（biofilm）。生物膜是由细菌及其分泌的胞外多聚物（如多糖、蛋白质、核酸等）组成的复杂聚合体，它的形成对感染治疗带来了严峻挑战。

生物膜内的细菌与浮游状态的细菌相比，具有截然不同的生理特性和耐药机制。生物膜的存在使得细菌对抗生素的耐药性显著增强，可达到浮游菌的10-1000倍，这是因为生物膜的结构阻碍了抗生素的渗透，使得药物难以有效到达细菌内部发挥作用。同时，生物膜内的细菌代谢活性降低，处于一种相对休眠的状态，对许多抗菌药物不敏感。此外，生物膜还能帮助细菌逃避宿主免疫系统的攻击，使得感染难以被彻底清除，从而导致感染反复发作，延长患者的病程，增加治疗成本和患者的痛苦，严重时甚至危及生命。据统计，由细菌生物膜引起的感染占所有医院感染的65%以上，其中金黄色葡萄球菌生物膜感染占据相当大的比例，因此，深入研究金黄色葡萄球菌生物膜的形成机制及相关基因，对于开发有效的防治策略具有重要的理论和实际意义。

通过对金黄色葡萄球菌生物膜形成及相关基因的检测与分析，我们能够深入了解生物膜形成的分子机制，揭示细菌耐药和致病的本质，为开发新型抗菌药物和治疗方法提供理论依据。例如，针对生物膜形成的关键基因或信号通路，研发特异性的抑制剂，有望打破生物膜的结构，增强抗生素的疗效，提高感染的治愈率。此外，对临床分离株的研究还可以为临床诊断和治疗提供指导，通过检测生物膜相关基因，预测细菌的致病性和耐药性，从而实现精准治疗，合理使用抗生素，减少耐药菌株的产生，对保障公众健康具有重要意义。

1.2金黄色葡萄球菌概述

金黄色葡萄球菌隶属于葡萄球菌属，是革兰氏阳性菌的典型代表。其细胞呈球形，直径约为0.5-1.5μm，在固体培养基上生长时，常呈典型的葡萄串状排列，故而得名。该菌无鞭毛，不能运动，无芽孢，在体外培养时一般不形成荚膜，但在宿主体内大多数菌株可形成荚膜多糖，这有利于细菌抗吞噬，促进其对细胞或生物合成材料表面的黏附。

金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上即可生长良好，兼性厌氧或需氧，最适生长温度为37℃，与人体体温一致，这使得它能够在人体环境中大量繁殖；最适pH为7.4，与人体生理pH相近。它具有高度的耐盐性，可在盐浓度接近10%的环境中生长，这一特性使其能够在一些高盐食品中存活和繁殖，如腌制肉类、咸鱼等，从而引发食物中毒。在基础培养基上，孵育24-48小时后，可形成直径约2mm的圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐、不透明的金黄色菌落，在血琼脂平板上，还可形成透明的溶血环（β溶血），溶血菌株大多具有致病性。多数菌株能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气，致病菌株还能分解甘露醇。

金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到它的踪迹，这使得食品受其污染的机会大大增加。在人群中，30%-80%的人为该病原菌的携带者，鼻咽部带菌率为20%-50%，而医务人员的带菌率可高达70%以上，传播途径主要包括污染手、打喷嚏、流鼻涕等。它是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起多种严重感染，致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶，如溶血毒素、杀白细胞素、血浆凝固酶、脱氧核糖核酸酶、肠毒素等，这些毒素和酶能够损伤人体组织和细胞，破坏免疫系统，导致感染的发生和扩散。

在医院感染中，金黄色葡萄球菌占据重要地位，是引起医院内交叉感染的重要致病菌之一。由于医院环境中存在大量免疫力低下的患者，以及各种侵入性医疗操作的频繁开展，使得金黄色葡萄球菌更容易在医院内传播和感染，引发诸如手术部位感染、导管相关感染、肺炎等多种医院感染疾病，严重影响患者的治疗效果和康复进程，增加医疗成本和患者的死亡率。此外，随着抗生素的广泛使用，金黄色葡萄球菌的耐药问题日益严重，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）等耐药菌株的出现，更是给临床治疗带来了极大的困难，成为全球公共卫生领域关注的焦点之一。

1.3生物膜的概念与形成机制

生物膜是指细菌在生长过程中，其细胞及其分泌的多种蛋白质、多糖