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本文介绍了植物根系活力的测定（TTC法）的测定方法，植物根系是活跃的吸收器宫和合成器官，根的生长情况和活力水平直接影响地上部的营养状况及产量水平。本实验练习测定根系活力的方法，为植物营养研兖提供依据。
一、原理:
氯化三笨基四氮哇（TTC）是标准氧化电位为80mV的氧化还原色素，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯甲zan,如下式：
生成的三苯甲zan比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化，所以TTC被广泛用作酶试验的氢受体,植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原.可因加入琥珀酸、延胡索酸、苹果酸得到增强,而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表，示脱氢酶活性，并作为根系活力的指标。
二、材料、仪器设备及试剂（一）材料
水培或砂培小麦、玉米等植物根系。
（二）仪器设备
分光光度计，分析天平（感量0.1mg）,电子顶载天平（感量0.1g）,温箱,研钵，三角瓶，漏斗，量简，吸量管，刻度试管，试管架,容量瓶，药勺，石英砂适量，烧杯。
（三）试剂（1）乙酸乙酯（分析纯）。（2）次硫酸钠（Na2S2O4,分析纯），粉末＜
（3）1%TTC溶液。准确称取TTC1.0g,溶于少量水中，定容到100mL。用〃、础族淬汕冰八/止m时稀释至需要的浓度。（4）磷酸缓冲液（仍5mol/L,pH7）。
（5）1mol/L硫酸。用量简取比重1.84的浓硫酸55mL,边搅拌边加入盛有（6）0.4mol/l.琥珀酸。称取琥珀酸4.7500mL蒸馄水的烧杯中，拎却后稀释至WOOmLo水中,定容至100mL即成。
三、实验步骤定性测定
配制反应液。把1%TTC溶液、0.4mol/L的琥珀酸和磷酸缓冲液按1:5:4比例混合。
把根仔细洗净，把地上部分从茎基切除。将根放人三角瓶中，倒人反应液，以浸没根为度，置37左右暗处放1~3h,以观察着色情况，新根尖端几毫米以及细侧根都明显地变成红色，表明该处有脱氢酶存在。
定量测定
TTC标准曲线的制作。取0.4%TTC溶液0.2mL放人10mL量瓶中，加少许Na2S2O4粉摇匀后立即产生红色的甲zan。再用乙酸乙酯定容至刻度,摇匀。
然后分别取此液0.25mL.0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL置10mL容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度，即得到含甲zan25ug、50ug、100ug、150ug
200ug的标准比色系列,以空白作参比，在485nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
称取根尖样品0.5g,放人10mL烧杯中，加人0.4%TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液10mL,把根充分浸没在溶液内，在37°C下暗保温1~3h,此后加人1mol/L硫酸2mL,以停止反应。(与此同时做一空白实验.，先加硫酸，再加根样品,37C°C暗保温后加硫酸,其溶液浓度、操作步骤同上)。
把根取出，吸干水分后与乙酸乙酯3~4mL和少量石英砂一起在研钵内磨碎，以提出甲膳，红色提取液移人试管.并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤二三次，皆移人试管，最后加乙酸乙酯使总量为10mL,用分光光度计在波长485nm，下比色，以空白试验作参比测出吸光度，查标准曲线，即可求出四氮哩还原量。
结果计算
单位根鲜重的四氮喳还原强度=藩〔mgh)〕联系我们:
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