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食品与发酵工业FOODANDFERMENTATIONINDUSTRIES
DOI:10.13995/ki.11-1802/ts.039485
引用格式:李玉琳,王霞,王亚铭,等.一株高产蛋白酶的耐盐型高地芽孢杆菌的鉴定与分析[J].食品与发酵工业,2025,51(8):
186-194.LIYulin,WANGXia,WANGYaming,etal.Identificationandanalysisofahigh-yieldproteasesalt-tolerantBacil-
lusaltitudinis[J].FoodandFermentationIndustries,2025,51(8):186-194.
一株高产蛋白酶的耐盐型高地芽孢杆菌的鉴定与分析
李玉琳,王霞,王亚铭,李启月,沙沙,郭紫娴,邢翔∗
(山东大学海洋学院,山东威海,264209)
摘要该研究从山东省威海市麻子港海岸带海洋沉积物中采样,筛选得到高产蛋白酶菌株,并对其特性、生长
条件以及酶活力进行探究。通过形态学观察、生理生化试验、16SrDNA序列分析和基因组分析鉴定菌株,采用
单因素结合响应面实验优化菌株的最佳生长条件,并于此条件下测定该菌株的蛋白酶活力。该菌株为高地芽孢
杆菌(Bacillusaltitudinis),盐度生长范围为0~160g/L,最适生长条件为:温度40℃,培养基初始pH值9,摇床转速
229r/min,盐度为30g/L,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为蛋白胨,在该条件下蛋白酶的酶活力可达99.747U/mL。
筛选获得的高地芽孢杆菌A1具备良好的产蛋白酶的能力和耐盐耐热性,可以为餐厨垃圾降解、工业废水处理、
微生物菌肥制作以及生产工艺调整提供生物学依据。
关键词高地芽孢杆菌;分离鉴定;响应面分析;蛋白酶
蛋白质是人类和其他动物的主要食物成分。在等,耐盐产蛋白酶菌株资源还需大量扩充。
工业生产中,某些蛋白质是食品工业及轻工业的重要本研究从山东省威海市麻子港海岸带海洋沉积物
原料,蛋白质在农业、畜牧业、水产养殖业领域也极其中取样筛选出一株高产蛋白酶且具有良好耐盐特性的
重要。工业生产中降解蛋白质的方法主要有酶降解、菌株,对其生长条件进行优化并进行酶活力测定,以期
酸碱降解、氧化降解、热降解。其中,酶降解因具有生利用其产蛋白酶和耐盐的特点,为餐厨废水、工业废水
产周期短、生产效率高、产品纯度高、副产物少等优点与微生物菌肥制作等领域提供新的菌株和酶试剂。
在工业生产中具有广阔的应用前景。
1材料与方法
蛋白酶是一种重要的水解酶类,其广泛存在于动
物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。但在工业生产1.1材料
中,蛋白酶的活力和稳定性受到多种环境因素的限1.1.1样品采集
制,使其在处理餐厨废水、工业废水与微生物菌肥制从山东省威海市麻子港海岸带海洋沉积物中采
作等工艺中降解效果不明显。因此,寻找能够在高盐集污泥。
环境下生长和产生蛋白酶的菌株具有急迫性和重要1.1.2培养基
[1]富集培养基(g/L):胰蛋白胨10,酵母浸粉5,
性。强济宇从土壤中筛选出一株高产碱性蛋白酶
的菌株DS5,有较高的耐盐性,能够水解酪蛋白、脱脂NaCl10,121℃灭菌20min。
[2]
牛奶和牛血清白蛋白等多种蛋白;李文静等从鱼蛋白质初筛培养基
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