水稻愈伤特异性启动子P_(OsCSPpro)在花生愈伤中的功能鉴定及碱基编辑效率分析.pdfVIP

中国油料作物学报2025，47（5）：1091-1099

ChineseJournalofOilCropSciencesdoi：10.19802/j.issn.1007-9084.2024258

水稻愈伤特异性启动子POsCSPpro在花生愈伤中的功能鉴定

及碱基编辑效率分析

1,223332222,4*1,2,4*

薛璐璐，李晓娜，罗丹丹，刘涵，渠鹏宇，黄冰艳，韩锁义，董文召，石磊，张新友

（1.沈阳农业大学农学院，辽宁沈阳，110161；

2.河南省农业科学院河南省作物分子育种研究院/农业部黄淮海油料作物重点实验室/河南省油料作物遗传改良重点实验室/

花生遗传改良国家地方联合工程实验室/河南生物育种中心有限公司,河南郑州，450002；

3.郑州大学农学院，河南郑州，450000；4.神农种业实验室，河南郑州，450002）

摘要：CRISPR/Cas9基因编辑系统的脱靶问题是研究者们一直以来的重点关注问题，采用愈伤特异性启动子驱

动Cas9蛋白能够降低编辑株系成苗后的脱靶风险。为有效降低脱靶效应，本研究克隆了一个源自水稻的愈伤特异

性启动子POsCSPpro，研究了其在花生愈伤中的表达活性及碱基编辑效率。GUS组织化学染色结果表明，该启动子在花

生愈伤中具有活性。选择AhALS2基因第190位氨基酸P190为靶点，以该启动子驱动胞嘧啶脱氨酶和nCas9蛋白，

构建碱基编辑载体并转化花生，对该启动子的编辑效率进行检验。结果表明，POsCSPpro驱动的胞嘧啶碱基编辑器在花

生中具有编辑活性，编辑效率为3.6%。

关键词：花生；愈伤特异性启动子；POsCSPpro；脱靶效应；GUS报告基因；碱基编辑

中图分类号：S565.2文献标识码：A文章编号：1007-9084（2025）05-1091-09

Functionalandbaseeditingefficiencyanalysisofricecallus-specificpromoterPOsCSPproinpeanutcallus

1,2233322

XUELu-lu，LIXiao-na，LUODan-dan，LIUHan，QYUPeng-yu，HUANGBing-yan，HANSuo-yi，

22,4*1,2,4*

DONGWen-zhao，SHILei，ZHANGXin-you

（1.CollegeofAgronomy,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110161,China;2.InstituteofCropMolecular

Breeding,HenanAcademyofAgriculturalSciences/NationalInnovationCentreforBio-breedingIndustry/KeyLaboratory

ofOilCropsin