肝特异性Rbp4基因敲除小鼠的建立及糖代谢特征分析.pdfVIP

２０２４年４月中国实验动物学报Ａｐｒｉｌ２０２４

第３２卷第４期ＡＣＴＡＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＵＭＡＮＩＭＡＬＩＳＳＣＩＥＮＴＩＡＳＩＮＩＣＡＶｏｌ．３２Ｎｏ．４

卢婉贤，马琦，王黎，等．肝特异性Ｒｂｐ４基因敲除小鼠的建立及糖代谢特征分析［Ｊ］．中国实验动物学报，２０２４，３２（４）：４９３－

５０２．

ＬＵＷＸ，ＭＡＱ，ＷＡＮＧＬ，ｅｔａｌ．Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｌｉｖｅｒ⁃ｓｐｅｃｉｆｉｃＲｂｐ４ｋｎｏｃｋｏｕｔｍｉｃｅａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｌｕｃｏｓｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ

－

ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＬａｂＡｎｉｍＳｃｉＳｉｎ，２０２４，３２（４）：４９３５０２．

－

Ｄｏｉ：１０３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５４８４７２０２４０４０１０

肝特异性Ｒｂｐ４基因敲除小鼠的建立

及糖代谢特征分析

１２１，２∗１２

卢婉贤，马琦，王黎，刘梦迪，郭宝平

（１．新疆医科大学公共卫生学院，乌鲁木齐８３００００；２．新疆医科大学第一附属医院，

临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室，乌鲁木齐８３００００）

【摘要】目的建立肝特异性Ｒｂｐ４基因敲除小鼠模型，并初步探索肝特异性Ｒｂｐ４基因缺失对糖代谢的影

响。方法利用Ｃｒｅ⁃ＬｏｘＰ技术，使用Ｃ５７／ＢＬ６Ｊ小鼠和Ａｌｂ⁃Ｃｒｅ小鼠构建肝特异性Ｒｂｐ４基因敲除小鼠模型。利用

ＰＣＲ及琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型。选取１０只１８周龄Ｃ５７／ＢＬ６Ｊ雄性小鼠为野生对照组（ＷＴ），１０只同周龄

ｆｌｏｘ／ｆｌｏｘ－

ｆｌｏｘ纯合且Ａｌｂ⁃Ｃｒｅ阴性小鼠为实验对照组（Ｒｂｐ４：Ｃｒｅ），１０只同周龄ｆｌｏｘ纯合且Ａｌｂ⁃Ｃｒｅ阳性小鼠为实验组

ｆｌｏｘ／ｆｌｏｘ＋

（Ｒｂｐ４：Ｃｒｅ）。分别利用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ及ｑＲＴ⁃ＰＣＲ验证小鼠肝中ＲＢＰ４蛋白及Ｒｂｐ４ｍＲＮＡ表达水平。利用

ｑＲＴ⁃ＰＣＲ检测其他组织中Ｒｂｐ４ｍＲＮＡ表达水平。采用苏木素⁃伊红（ＨＥ）染色观察肝组织形态。利用血糖仪检测

小鼠尾静脉血液标本血糖值，进行葡萄糖耐量及胰岛素耐量实验。利用ｑＲＴ⁃ＰＣＲ检测肝糖代谢基因磷酸烯醇丙

酮酸羧化酶（Ｐｅｐｃｋ）和葡萄糖⁃６⁃磷酸酶（Ｇ６ｐａｓｅ）表达水平。结果成功繁育并鉴定出肝特异性Ｒｂｐ４基因敲除小

ｆｌｏｘ／ｆｌｏｘ＋

鼠。Ｒｂｐ４：Ｃｒｅ组小鼠肝中ＲＢＰ４蛋白表达显著减少（Ｐ＜００５），Ｒｂｐ４ｍＲＮＡ表达显著减少（Ｐ＜００５）。三组

小鼠脂肪、肾、胰、脾、心脏和肌肉组织中Ｒｂｐ４ｍＲＮＡ的相对表达量差异无显著性（Ｐ＞００５）。ＨＥ染色、葡萄糖耐

量及胰岛素耐量实验结果表明肝特异性Ｒｂｐ４基因敲除对肝组织形态、葡萄糖耐量及胰岛素耐量无显著影响（Ｐ＞