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学必求其心得,业必贵于专精
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专题2??细胞工程
(一)植物细胞工程?????
1。植物组织培养技术
(1)原理:植物细胞的全能性?
(2)过程:离体的植物器官、组织或细胞→脱分化→?愈伤组织→?再分化→??植物体?
常用的植物激素生长素和细胞分裂素。?
(3)用途:微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织:原因是病毒很少,甚至无毒)、制造人工种子、单倍体育种(最大的优点是明显缩短育种年限,得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。?
2.植物体细胞杂交技术?
(1)原理:细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
去壁的方法:酶解法;(纤维素酶和果胶酶)
诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电激等.化学法是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。?
(3)意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。?
(二)动物细胞工程???
动物细胞工程中常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等,其中,动物细胞培养是其他技术的基础。
?1.动物细胞培养?
(1)流程:取动物组织块→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。?
(2)悬液中分散的细胞很快就贴服在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞接触抑制.?
(3)动物细胞培养需要满足以下条件?
①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。?
②营养:培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐等。通常需加血清、血浆等天然成分。?
③温度和PH:适宜温度:哺乳动物多是36.5℃+0。5℃;pH:7.2~7.4
④气体环境:95%空气+5%?CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH.?
(4)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质。?
2。动物体细胞核移植技术和克隆动物
2.动物体细胞核移植技术和克隆动物?
(1)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较难)。?
(2)选用去核卵母细胞的原因:比较大,容易操作;细胞质多,营养丰富;含有多种促进细胞发挥全能性的物质.?
(3)体细胞核移植的大致过程是:(书本P74)?
3。动物细胞融合?
(1)动物细胞融合也称细胞杂交,原理是细胞膜的流动性。?
(2)诱导动物细胞融合方法与植物原生质体融合方法类似,常用的诱导因素有PEG、灭活的病毒、电激等。?
(3)动物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和的障碍,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。?
4。单克隆抗体??
(1)单克隆抗体的制备过程:?
????
(2)杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生专一的抗体。?
(3)单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。?
(4)单克隆抗体的作用:①?作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。?
②?用于治疗疾病和运载药物:可制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞所在位置。
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