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第10章生物技术技术与工程
第3讲基因工程(含生物技术的平安性和
伦理问题)
考纲要求
核心素养
1.基因工程的诞生Ⅰ
2.基因工程的原理及技术(含DNA的粗提取与鉴定)Ⅱ
3.基因工程的应用Ⅱ
4.蛋白质工程Ⅰ
5.转基因生物的平安性Ⅰ
6.生物武器对人类的威胁Ⅰ
7.生物技术中的伦理问题Ⅰ
生命观念
结合生活或生产实例,利用基因的结构与功能理解基因工程的原理及蛋白质工程的概念及流程。
科学探究
针对人类生产或生活的需求,选取恰当的基因工程技术和方法,尝试提出初步的工程学设想,进行简单的设计和制作。
社会责任
面对日常生活或社会热点话题中与基因工程有关的话题,基于证据运用生物学根本概念和原理,就基因工程与平安性说明自己观点并展开讨论。
一、基因工程的操作工具
(1)供体:提供。
(2)操作环境:。
(3)操作水平:水平。
(4)原理:。
(5)受体:表达目的基因。
(6)本质:性状在体内的表达。
(7)优点:克服的障碍,定向改造生物的。
(1)限制性核酸内切酶(简称:)
①来源:主要是从生物中别离纯化出来的。
②作用:识别特定的并切开特定部位的两个核苷酸之间的。
③结果:产生或平末端。
(2)DNA连接酶
①种类:按来源可分为E·coliDNA连接酶和。
②作用:将双链DNA片段“缝合〞起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的。
③DNA连接酶和限制酶的关系
(3)载体
①种类:、噬菌体、动植物病毒等。
②质粒的特点eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(能自我复制,有一个至多个限制酶切割位点,有特殊的标记基因))
eq\o\ac(○,3)载体的作用及作为载体的条件
(1)作用:①作为运载工具,将目的基因转移到受体细胞内。②利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。
(2)条件与目的
条件
目的
对受体细胞无害
不影响受体细胞正常的生命活动
在受体细胞中稳定存在并大量复制
目的基因数量可扩增
有一个至多个限制酶切割位点
以便与外源基因连接
具有特殊的标记基因
以便将含有目的基因的受体细胞筛选出来
【探究·实践】DNA的粗提取与鉴定
1.实验原理
(1)DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
溶解规律
2mol/LNaCl溶液
0.14mol/LNaCl溶液
DNA
溶解
析出
蛋白质
NaCl溶液物质的量浓度从2mol/L逐渐降低的过程中,溶解度逐渐增大
局部发生盐析沉淀
溶解
(2)DNA不溶于,但是细胞中的某些蛋白质那么溶于酒精,利用这一原理可将DNA与蛋白质进一步别离。
(3)DNA与二苯胺沸水浴加热,呈。
2.操作流程
材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织
↓
破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞→加蒸馏水→用玻璃棒搅拌→用纱布过滤→收集滤液
↓
eq\x(去除杂质:)利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质
↓
DNA的析出:将处理后的溶液过滤,参加与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液
↓
DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中参加二苯胺试剂,混合均匀后将试管置于沸水中加热5min,溶液变成蓝色
二、基因工程的操作过程与应用
目的基因的筛选与获取(1)基因工程的操作步骤
目的基因的筛选与获取
①—〔a.筛选适宜的目的基因b.利用PCR获取和扩增目的基因〕
↓
②eq\x(基因表达载体的构建)—组成eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(a.目的基因,b.启动子,c.终止子,d.标记基因))
↓
③eq\x(将目的基因导入受体细胞)—方法
↓
④eq\x(目的基因的检测与鉴定)DNA分子杂交分子杂交抗原—抗体杂交个体生物学水平的鉴定检测重组性状的表达))
〔2〕基因表达载体的构建
eq\o\ac(○,1)基因表达载体的组成及作用
eq\o\ac(○,2)基因表达载体的构建过程
(3)目的基因导入不同受体细胞的过程
生物种类
植物
动物
微生物
常用方法
农杆菌转化法
显微注射技术
感受态细胞法
受体细胞
体细胞或受精卵
受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达
将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物
Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子
(4)基因工程的应用:培育转基因植物和,生产基因工程药物,进行基因治疗。
(1)流程图
写出流程图中字母代表的含义:
A.,B.,C.,D.,E.。
(2)结果:改造了现有蛋白质或制造出。
(3)应用:
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