基于流式细胞仪分析的欧洲云杉原胚团细胞核提取液筛选.pdfVIP

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Ａｕｇ.２０２５ꎬ４５(８):１４７５１４８３

ＤＯＩ:１０.１１９３１/ｇｕｉｈａｉａ.ｇｘｚｗ２０２４０１００２

胡继文ꎬ高晗ꎬ王军辉ꎬ等ꎬ２０２５.基于流式细胞仪分析的欧洲云杉原胚团细胞核提取液筛选[Ｊ].广西植物ꎬ４５(８):

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１４７５１４８３.

ＨＵＪＷꎬＧＡＯＨꎬＷＡＮＧＪＨꎬｅｔａｌ.ꎬ２０２５.ＳｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｎｕｃｌｅｉｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｂｕｆｆｅｒｆｏｒＰｉｃｅａａｂｉｅｓｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃ

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ｍａｓｓｅｓｂａｓｅｄｏｎｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].Ｇｕｉｈａｉａꎬ４５(８):１４７５１４８３.

基于流式细胞仪分析的欧洲云杉原胚团细胞核提取液筛选

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胡继文ꎬ高晗ꎬ王军辉ꎬ朱天擎

(１.中国林业科学研究院林业研究所ꎬ国家林业和草原局林木培育重点实验室ꎬ林木遗传育种全国重点实验室ꎬ北京１０００９１ꎻ

２.中国林业科学研究院ꎬ林木遗传育种全国重点实验室ꎬ北京１０００９１ꎻ３.三峡植物园管理处ꎬ湖北宜昌４４３１１１)

摘要:细胞核悬液是开展多种分子生物学研究的重要基础ꎮ为高效制备欧洲云杉(Ｐｉｃｅａａｂｉｅｓ)原胚团

(ｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃｍａｓｓｅｓꎬＰＥＭ)细胞核悬液ꎬ该研究应用流式细胞仪检测ＤＮＡ含量ꎬ对ＬＢ０１、Ｏｔｔｏｓ、Ｇａｌｂｒａｉｔｈｓ、

ＧＰＢ、ＷＰＢ和ＴｒｉｓＭｇＣｌ６种细胞核提取液提取的欧洲云杉胚性细胞系ＰａＶⅢ、ＰＩ３、ＰＩ５的ＰＥＭ细胞核数量２

和质量进行评估ꎬ筛选最适提取液ꎬ并对最适提取液稳定性和细胞核完整性进行检测ꎮ结果表明:(１)与其他

提取液相比ꎬ欧洲云杉胚性细胞系ＰａＶⅢＰＥＭ经ＬＢ０１提取获得的细胞核数量最多且细胞碎片少ꎮ(２)ＰＥＭ

经ＬＢ０１提取获得的细胞核Ｇ０/Ｇ１和Ｇ２/Ｍ的核变异系数均小于５％ꎬ变异系数小ꎮ(３)不同欧洲云杉细胞系

ＰＥＭ经ＬＢ０１提取的细胞核数量及细胞碎片无显著性差异ꎬ稳定性高ꎮ(４)显微观测显示ꎬＬＢ０１提取欧洲云

杉ＰＥＭ获得的细胞核膜保持较高的完整性ꎮ综上认为ꎬＬＢ０１提取欧洲云杉ＰＥＭ细胞核能表现出更好的核

质量ꎬ可作为欧洲云杉首选细胞核提取液ꎮ该研究结果为裸子植物细胞核的提取提供了参考ꎮ

关键词:针叶树ꎬ欧洲云杉ꎬ原胚团ꎬ植物细胞核提取ꎬ流式细胞仪

中图分类号:Ｑ９４２文献标识码:Ａ文章编号:１０００￣３１４２(２０２５)０８￣１４７５￣０９

Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｎｕｃｌｅｉｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｂｕｆｆｅｒｆｏｒ

Ｐｉｃｅａａｂｉｅｓｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃｍａｓｓｅｓｂａｓｅｄ

ｏｎｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙａｎａｌｙｓｉｓ

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ＨＵＪｉｗｅｎꎬＧＡＯＨａｎꎬＷＡＮＧＪｕｎｈｕｉꎬＺＨＵＴｉａｎｑｉｎｇ

(１.ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒｅｅＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｇꎬＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＴｒｅｅＢｒｅｅｄｉｎｇａｎｄＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＳｔａｔｅＦｏｒｅｓｔｒｙａｎｄＧｒａｓｓｌａｎｄ

ＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎꎬＲｅｓｅａｒ