糖脂肪蛋白质的鉴定.pptVIP

生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定

一、实验原理

某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应

R—CHOCu(OH)2Cu2O↓R—COOH

2mlNaOH+4～5滴CuSO4

最初是用来检验双缩脲的

（NH2—OC—NH—CO—NH2）

二、实验流程

（1）还原糖的鉴定

含糖量高、白色或近于白色的植物组织

制浆→过滤→取液

还原糖与斐林试剂在加热煮沸条件下生成砖红色沉淀

二、实验流程

（3）蛋白质的鉴定

蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应

（1）还原糖——含糖量高、颜色较浅的组织。如苹果、梨、白萝卜等

（2）脂肪——富含脂肪的种子，如花生。如果是新鲜种子，不要浸泡；如是干种子，需要浸泡3～4h。

（3）蛋白质——富含蛋白质的生物组织。植物材料常用大豆，浸泡1～2d，适于研磨，动物材料常用鸡蛋蛋白。

1、实验材料的选择

2、斐林试剂与双缩脲试剂的比较

比较项目

斐林试剂

双缩脲试剂

不同点

使用方法

反应条件

反应原理

颜色

浓度

相同点

甲、乙液混合均匀后使用，且现配现用

先加A液，再加B液

需加热煮沸

不需加热即可反应

醛基被氧化成羧基，Cu（OH）2被还原成Cu2O↓

具有二个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物

砖红色

紫色

乙液CuSO4浓度为0.05g/ml

B液CuSO4浓度为0.01g/ml

都含有NaOH、CuSO4两种成分，且所用NaOH浓度均为0.1g/ml

3、斐林试剂与班氏试剂的比较

比较项目

斐林试剂

班氏试剂

不同点

成分

使用方法

保存方法

相同点

CuSO4、NaOH+酒石酸钠

混合后可长期保存，随时启用

由于NaOH是强碱，产生的Cu（OH）2多，易沉淀，故甲乙液分开保存

（1）反应原理相同，均是新制的Cu（OH）2与醛基反应；（2）反应均需要加热煮沸1～2min。

CuSO4、Na2CO3+柠檬酸钠

甲、乙液混合均匀后使用，且现配现用

由于Na2CO3是弱碱，产生的Cu（OH）2少，不易沉淀，故可混合后长期保存