实验室安全与防护.pptVIP

医学生化与分子生物学

实验室安全与防护;实验室安全涉及面广;化学试剂多：氯仿、甲醇、乙醇、酸碱等

生物样品多：细胞、细菌、蛋白、抗体、核酸、临床标本等

仪器多：高压蒸气灭菌锅、电泳仪、PCR仪、离心机、紫外透射仪等

特殊样品、特殊动物：标记探针、转基因动物、各种病理动物模型;实验室安全事故案例;事故原因;保障个人及他人的人身安全

保障实验室的安全：防火、防水等

避免实验室内环境污染：化学、生物污染

避免实验室外环境污染：河流、土壤

;Outline;实验时：穿隔离衣，戴消毒手套，不穿凉鞋、不露趾鞋

实验后：整理台面、处理废弃物品(不得随意丢弃);化学试剂危险性标志;氯仿;使用与防护：

不可倒入下水道，以免集聚引起火灾

远离火源、热源

保持室内良好通风

实验室里不宜大量贮存;使用与防护：

配制时，大量放热，使用耐热容器

浓酸贴壁分次加入重铬酸钾水溶液

使用时，戴长臂耐酸乳胶手套;使用与防护：

废液不能直接倒入水槽！

方法：先大量用水稀释，然后倒入厕所等下水道或水槽，再用大量自来水冲洗下水道或水槽;特点：

核酸嵌入剂，用于核酸电泳的染色

强致突变剂，工作浓度0.5μg/ml;特点：

易发生脱氨反应，避光、低温、短期保存

强神经毒性，可透皮吸收;特点：

琼脂糖凝胶、PAGE胶不易降解;医学分子生物学实验室常用生物材料;《医疗废物管理条例》2003年6月16日

按类别、使用专用包装袋收集医疗废物

《中华人民共和国传染病防治法》

（04年8月28日修订版）;Biohazardwarningsign;生物材料危害警告标识;一级防护:

--安全设备、个体防护装置

(生物安全柜；防护衣、帽等)

二级防护：

--实验室的特殊设计要求

规范操作：

--严格管理制度

--标准化的操作程序;生物样品的正确使用;生物样品的正确使用;生物样品的正确使用;需置于EP管或有盖的容器内，防止样品流出

应有明显的标记（如：感染性材料…)

样本应低温运输（4℃或以下）

如有破损、泄漏，需按规定处理;使用实验室微波炉、冰箱烹调或储存食物

不用适当的防护设备，如隔离衣、手套等

不按实验规程操作，或意外受伤;实例;实例;实例;储存：专门放置生物废弃物的容器

灭活：所有生物废弃物必须灭活后丢弃，如高压灭活等

运输：出实验室经灭活的弃物必须使用专用密闭防漏的容器运输;高压蒸气灭菌（autoclave）

-方法：121℃，15psi，15－40min

-适合所有污染物的灭菌

紫外线照射灭菌：空气、物体表面杀菌

-无菌室或污染区域照射，至少30min;70～75%Ethanol

－皮肤、实验台面的污染

次氯酸钠(漂白剂，1-20%稀释液)

－台面污染，玻璃器皿等灭菌;实验室入口：生物危险标志、生物安全级别、负责人姓名和电话、进入实验室的特殊要求等

禁止非工作人员进入实验室

使用专用的防护性外衣

－不得穿防护衣到非实验室区域

－防护衣在指定区域洗涤，不得带回家洗涤;常用仪器与玻璃器皿

－正确使用与安全防护;低速、高速、超速离心机

紫外透射反射分析仪、分光光度计

电泳相关设备、各种PCR仪、酶标仪

凝胶成像仪、流式细胞仪、化学发光仪

高压蒸汽灭菌器（锅）

电热干燥箱（烘箱）、微波炉等;仪器使用安全;离心机：

离心机需放置于平稳、牢固的地方

远离酸碱等腐蚀性试剂

样品离心前必须进行平衡

离心样品对称放置

离心前务必检查转子是否挂好

低温离心机使用后，

切勿关盖长期放置！;常用仪器的正确使用;蒸气高压灭菌锅：

使用前检查是否有蒸馏水（经常更换,预防长菌、水中污染物堵塞，烧坏加热板）

以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓，旋紧盖子，务必注意放气阀

让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀,开盖

隔离操作！;紫外投射仪：

检查经EB染色后的凝胶

必需戴手套操作，尽量避免仪器外部污染

如有条件，可戴防护眼睛

不可长时间开紫外灯;如需面对UV光时，请戴安全眼镜(普通玻璃镜片亦可)。

无菌室请在入口处标示UV光是否在使用中。请先确定UV光关闭后才进入无菌室;烘箱：;冰箱：;摇菌、筛选克隆后的器皿、培养瓶

浸泡于漂白水灭菌后→清洗→高压灭菌

污染过病毒、传染病患者的血样的容器

高压灭菌（或其他方法）→清洗

污染放射性同位素等物质的容器

特殊试剂处理后→清洗;量筒

－不能贮存浓酸、浓碱

－不能加热

血清瓶、试剂瓶

－可高压灭菌、烘干(松旋瓶盖)

抽滤瓶

－非耐热容器，不可直火加热;玻璃器皿的正确使用;意外事件的防范与处理;意外事件处理

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