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齿瓣石豆兰总黄酮指纹图谱及抗肿瘤活性谱效分析*

○黄丽芸陈小兵

摘要：目的：采用HPLC（高效液相色谱）指纹图谱与体外抗肿瘤活性相关联，建立谱效关系，通过分析化学成分与

药效活性的相关性，筛选出具有代表性的化合物，进而探索齿瓣石豆兰抗肿瘤作用的药效物质基础。方法：通过HPLC

法建立齿瓣石豆兰总黄酮指纹图谱，以人乳腺癌细胞株（MCF-7）作为体外模型进行抗肿瘤活性研究，运用灰色关联度

分析技术，明确指纹图谱中共有峰对抗肿瘤活性的关联程度，确定反映药效的重要特征峰。结果：6批指纹图谱中共标

示12个共有峰，其中采用灰色关联度分析，齿瓣石豆兰与抗肿瘤相关系数大于0.6的色谱峰共4个。结论：齿瓣石豆

兰体外抗肿瘤作用是其内有效成分群共同作用的结果，为中药的谱效关联指纹图谱的建立、中药的质量控制及评价标准

的制定提供了新的思路和方法。

关键词：齿瓣石豆兰；总黄酮；指纹图谱；抗肿瘤；谱效关系

齿瓣石豆兰为兰科石豆兰属植齿瓣石豆兰样品分别于2021年取齿瓣石豆兰，烘干后粉碎，

物，为国家濒危Ⅱ级保护植物，齿瓣采江西西南部（遂川）等主产区，共过筛，精密称取20g，置圆底烧瓶

石豆兰生长于山地林中，具有滋阴降计6个批次，样品编号S1-S6。样品中，加入500ml60%乙醇溶液，连续

火、清热消肿的功效[1]。目前，关于采收后洗净、晒干、碾碎，过筛，阴加热回流5h，放冷后过滤，得滤液

齿瓣石豆兰相关研究鲜见报道。课题凉干燥处储藏备用。所有样品经本校后，减压回收乙醇至无醇味，转移至

组前期已对其化学成分及抗肿瘤活性中药教研室鉴定为兰科植物齿瓣石50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，

进行了初步筛选[2-3]。本研究拟建立豆兰。摇匀，即得供试品提取液。取浸泡好

齿瓣石豆兰中总黄酮类成分的高效液二、方法与结果的聚酰胺树脂，装柱，用水洗至无醇

相色谱法（HPLC）指纹图谱，并评（一）齿瓣石豆兰总黄酮指纹图味，精密量取上述样品提取液20ml，

价齿瓣石豆兰对肿瘤细胞的增殖抑制谱的建立用水60ml洗脱，弃去洗脱液，再用

率。通过灰色关联度分析，明确指纹1.色谱条件70ml50%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，

图谱中共有峰对抗肿瘤活性的贡献关色谱柱：岛津C18柱（250mm置水浴蒸干，残渣加适量甲醇使溶解，

联程度，进而确定反映药效的重要特×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-转移至25ml量瓶中，加甲醇稀释至

征峰，为完善齿瓣石豆兰的质量控制水（梯度洗脱，60min）；柱温：刻度，摇匀[4-6]，即得。

体系提供理论依据。40℃；流速：1mL/min；进样量：（二）方法学考察

一、材料10μL；检测波长：254nm。1.精密度试验

（一）仪器设备2.对照品溶液的制备取齿瓣石豆兰供试品溶液，

高效液相色谱仪（岛津LC-取芦丁、异槲皮苷、金丝桃苷、按“2.1”项下色谱条件连续进样

20），色谱柱（岛津Shim-pack新绿原酸、没食子酸、绿原酸、异绿6次，记录色谱图谱，标记芦丁为