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Chapter6大肠杆菌的克隆载体;1大肠杆菌的克隆载体;1大肠杆菌的质粒;1以大肠杆菌为基础的质粒;TheusefulpropertiesofpBR322;pBR322的系谱;1.2其它大肠杆菌克隆载体质粒;1.2其他的大肠杆菌克隆载体质粒;;VerysimilartopUC;2.M13噬菌体为基础的克隆载体;;2.1载体M13mp2的构建;(a)M13mp2;2.2M13mp7—对称的克隆位点;(b)M13mp7;CloningwithM13mp7;2.2M13mp7—对称的克隆位点;RecoveryofclonedDNA;2.3更复杂M13载体;;;2.4质粒-M13杂交载体;2.4质粒-M13杂交载体;Phagemids(噬粒)
——Hybridplasmid-M13vectors;;3以λ噬菌体为基础的克隆载体;天然λgenome作为克隆载体的两个难题;3.1可切除的λ片段;●Segmentsoftheλgenomecanbe
deletedwithoutimpairingviability
20~35kb,‘non-essentialregion’;3.2限制性位点的缺失;Figure6.15
UsingnaturalselectiontoisolateλphagelackingEcoRIrestrictionsites.;3.3λ克隆载体;3.3λ克隆载体;;3.3λ克隆载体;;3.4利用插入载体和替换载体克隆;3.4利用插入载体和替换载体克隆;●Cloningexperiments:;;3.5粘粒;3.6粘粒克隆;Atypicalcosmid;Cloningexperiment;4大容量λ和其他类型的载体;4大容量λ和其他类型的载体;4大容量λ和其他类型的载体;λandotherhighcapacityvectorsenable
genomiclibrariestobeconstructed;4用于构建基因文库的大容量λ和其他类型的载体;4大容量λ和其他类型的载体;5其他细菌载体;思考题
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