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双黄补对牙周膜细胞在玉米醇溶蛋白支架上黏附生长的多维度探究与机制解析

一、引言

1.1研究背景与意义

牙周炎是一种常见的口腔疾病，其主要表现为牙周组织的炎症反应，如牙龈出血、牙周袋形成、牙槽骨吸收以及牙齿松动移位等。牙周炎不仅严重影响口腔健康，导致牙齿功能下降，影响患者的正常饮食和发音，降低生活质量，还是造成成人牙齿丧失的主要原因。据相关研究表明，我国成年人牙周炎的患病率高达90%以上，这一数据充分显示了牙周炎在我国的高发性和严重性，给患者个人以及社会都带来了沉重的负担。

在牙周炎的治疗中，牙周组织再生是关键。牙周膜细胞作为牙周组织的重要组成部分，具有保持牙齿稳定性和保护牙齿的功能，在牙周组织再生过程中扮演着至关重要的角色。牙周膜细胞能够通过增殖、分化等活动，促进牙周组织的修复和再生，对牙周病患者余留牙的保留与维持具有重要意义。而支架材料作为组织工程学的三大要素之一，能够为种子细胞提供黏附和生长的空间，发挥结构支撑作用，积极引导组织或器官再生。因此，使用支架材料是治疗牙周疾病的一种有效方法。

玉米醇溶蛋白是一种天然的生物材料，具有较好的生物相容性、良好的支架结构以及可降解性，被广泛应用于骨组织工程和软组织再生治疗。它能够为牙周膜细胞的生长提供适宜的微环境，促进细胞的黏附和增殖，有利于牙周组织的修复。而双黄补作为一种中药，由黄连、黄芩、骨碎补等中药配伍而成，从促进牙周组织再生修复、抑制炎症反应、抗菌及抗内毒素等多方面发挥治疗效果。其中黄芩和黄连具有明显的抗炎、抗菌作用，骨碎补则能更好地促进牙周组织修复与再生，三种药物相辅相成，联合作用，促进牙周病患者的痊愈，且因其是天然药物，无明显毒副作用，更易被患者接受。

然而，目前关于双黄补对牙周膜细胞在玉米醇溶蛋白支架材料上黏附生长的影响尚未有深入研究。探究这一影响，不仅可以深入了解双黄补在牙周组织再生中的作用机制，还能够为牙周疾病的治疗提供新的支架材料选择和治疗方案，具有重要的临床实用价值。同时，对于双黄补作为生物活性物质的作用机制研究也有一定的参考意义，有助于推动牙周组织工程学的发展，为广大牙周炎患者带来新的治疗希望。

1.2国内外研究现状

在国外，对于玉米醇溶蛋白支架材料的研究主要集中在其制备工艺的优化以及在不同组织工程领域的应用探索。有研究利用3D打印技术制备玉米醇溶蛋白支架，通过精确控制打印参数，获得了具有精准孔隙结构和力学性能的支架，能够更好地满足细胞生长和组织再生的需求。在牙周组织工程应用方面，研究发现玉米醇溶蛋白支架可以促进牙周膜细胞的黏附与增殖，为牙周组织再生提供了良好的载体。但对于双黄补与玉米醇溶蛋白支架材料结合的研究较少，仅有少量研究提及天然药物与支架材料结合的可能性，但未针对双黄补展开深入探讨。

在国内，关于玉米醇溶蛋白支架材料的研究同样取得了一定进展。通过溶剂浇铸/粒子沥滤法制备的玉米醇溶蛋白支架，具有良好的生物相容性和一定的机械强度，能够支持牙周膜细胞的生长和分化。在双黄补对牙周膜细胞作用的研究上，国内学者做了大量工作，发现双黄补能够促进人牙周膜细胞的蛋白质合成，使细胞代谢更旺盛，功能更活跃，还可使成纤维细胞生长因子18水平升高，诱导人牙周膜细胞向成骨样细胞转化，增强细胞合成胶原的功能。同时，双黄补煎液对牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌和具核梭杆菌等牙周可疑致病菌均有较明显的抑菌作用。然而，将双黄补与玉米醇溶蛋白支架材料相结合，研究其对牙周膜细胞黏附生长影响的研究还较为缺乏，存在一定的研究空白。

总体而言，当前对于玉米醇溶蛋白支架材料和双黄补在牙周组织工程中的研究各有进展，但两者结合的研究尚显不足。深入研究双黄补对牙周膜细胞在玉米醇溶蛋白支架上黏附生长的影响，有望填补这一领域的空白，为牙周疾病的治疗提供新的策略和方法。

1.3研究目的与内容

本研究旨在深入探讨双黄补对牙周膜细胞在玉米醇溶蛋白支架材料上黏附生长的影响，并初步探究其作用机制，为牙周疾病的治疗提供新的理论依据和治疗方案。具体研究内容如下：

材料准备：精心准备实验所需的各种材料，包括玉米醇溶蛋白支架材料，它将作为牙周膜细胞生长的支撑载体；DMEM培养基，为细胞提供必要的营养物质；胎牛血清，含有多种细胞生长因子，促进细胞的生长和增殖；双抗素，防止细胞培养过程中的微生物污染；Trypsin-EDTA消化液，用于细胞的消化传代；PBS缓冲液，用于细胞的洗涤和保存；以及双黄补，这是本研究的关键生物活性物质。

细胞培养与分组：从新鲜的狗上颌牙周膜中采用组织块法扩增出牙周膜细胞，经过CE实验鉴定，筛选出细胞纯度超过90%的牙周膜细胞，确保实验细胞的质量和纯度。将筛选后的牙周膜细胞接种于玉米醇溶蛋白支架材料上，并加入不同浓度的双黄补（0μg/mL，10μg/mL