建兰丙二烯氧化环化酶基因（Ce - AOC）功能解析：从分子机制到生理响应.docxVIP

建兰丙二烯氧化环化酶基因（Ce-AOC）功能解析：从分子机制到生理响应

一、引言

1.1研究背景与目的

建兰（学名：Cymbidiumensifolium(L.)Sw.），作为兰科兰属的地生植物，别名众多，如四季兰、八月兰、剑叶兰等。其广泛分布于东南亚和南亚各国，北至日本；在中国，安徽、浙江、江西、福建、台湾、湖南等地均有产出。建兰多生长于海拔600-1800米的山坡林下、路边、灌丛中、疏林下、草丛中或山谷旁。其假鳞茎呈卵球形，包藏于叶基之内，叶带形且富有光泽，花葶直立，从假鳞茎基部发出，总状花序，花常有香气，色泽变化较大，通常为浅黄绿色而具紫斑，花期通常为6-10月。

建兰拥有极高的观赏价值，其株丛蓬勃，叶态多姿，叶片终年碧绿，花形多样，色彩丰富，香气浓郁，是备受青睐的盆栽花卉，适合摆放于客厅、会议室、宾馆或庭园。不仅如此，建兰还有食用价值，其开放的花可采摘供食，也能作为菜肴配料。在药用方面，建兰的叶可入药，据《上海市中药饮片炮制规范》记载，具有理气解郁、清利湿热、凉血的功效。然而，由于生境丧失以及人为大量采集等因素，建兰种群数量和规模急剧减小，于2004年被《中国物种红色名录》收录为易危物种，2013年被《中国生物多样性红色名录》收录为濒危物种，同年被列入《濒危动植物种国际贸易公约(CITES)》附录Ⅱ，2021年被中国《国家重点保护野生植物名录》列为二级保护植物。

丙二烯氧化环化酶基因（AOC）在植物生长发育和抗逆过程中扮演着举足轻重的角色。AOC是茉莉酸（JA）生物合成途径中的关键酶基因，能够特异性地催化丙二烯氧化物形成茉莉酸产物的前体1，2-氧-植物二烯酸，其活性在中间产物转化为茉莉酸的过程中起着关键作用。茉莉酸作为一类基本的植物激素，在植物生长过程中作用显著。一方面，它可调节植物的生长发育过程，如种子萌发、器官发育和衰老死亡等；另一方面，还参与植物的生物胁迫和非生物胁迫过程，如逆境胁迫、病原菌侵扰等。已有研究显示，AOC可通过提高表达促进JA的形成，进而提高植物抵抗外界不良环境胁迫的能力。

目前，关于建兰的研究多集中在形态特征、栽培技术、观赏价值等方面，对于其基因功能的研究相对较少，尤其是建兰丙二烯氧化环化酶基因（Ce-AOC）的功能研究尚属空白。本研究旨在克隆建兰Ce-AOC基因，并对其进行生物信息学分析，探究其在不同组织以及逆境胁迫下的表达模式，通过转基因技术初步验证其功能，为深入了解建兰的生长发育和抗逆分子机制奠定基础，同时也为建兰的遗传改良和品种选育提供理论依据。

1.2国内外研究现状

在国内外，建兰的研究逐渐受到关注。在分类学方面，建兰的分类地位已明确，为兰科兰属地生植物，其命名历史可追溯到1753年，由Linnaeus基于模式标本命名，后续经过多次分类调整，最终确定了现有的学名。在生物学特性研究上，明确了建兰的形态特征、生长习性、繁殖方式等。建兰假鳞茎卵球形，叶带形有光泽，花葶直立，总状花序，花色多样且具香气，花期6-10月，喜温暖湿润、凉爽的环境，耐寒性差，喜光但怕强光直射，适宜在肥沃、疏松、排水良好的腐叶土中生长。

在基因工程研究领域，建兰也取得了一定进展。例如，华南植物园克隆了建兰开花整合基因CeFT，实验证明该基因能够影响植物生长发育进程，缩短童期并促使植物提前开花，为建兰的花期调控提供了有效的技术手段；有研究对建兰转录组数据进行搜索，开发了基因内部SSR标记，可用于建兰的遗传多样性、图谱构建和基因定位等研究；还有研究对建兰MYB基因家族进行全基因组分析，鉴定出建兰花色形成的关键调控基因，为建兰花色改良和分子育种奠定了基础。

对于植物中AOC基因的研究，自2000年首个AOC基因在番茄中克隆报道以来，该基因已在玉米、拟南芥、甘蔗、黄花苜蓿、蒺藜苜蓿等多种植物中被克隆并进行了相关功能研究。在甘蔗中，ScAOC基因在根、茎、叶中均有表达，在PEG、NaCl及外源MeJA胁迫下，基因相对表达量先上升后下降，在病原菌和粘虫取食胁迫下，相对表达量显著上升，表明ScAOC可能参与甘蔗对生物或非生物胁迫的防御反应。在黄花苜蓿和蒺藜苜蓿中，低温和病原菌诱导MfAOC2的表达，过表达MfAOC2的转基因蒺藜苜蓿耐寒性和抗病性提高，而MtAOC2的Tnt1插入突变体mtaoc2耐寒性和抗病性降低，揭示了MfAOC2和MtAOC2通过JA信号途径介导苜蓿耐寒性和抗病性的分子机制。

然而，针对建兰Ce-AOC基因的研究尚未见报道。在已有的建兰基因研究中，主要围绕开花、花色等性状相关基因，对于抗逆相关的AOC基因研究存在明显空白。这不