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CTGFshRNA对人翼状胬肉成纤维细胞关键因子表达影响及机制探究

一、引言

1.1研究背景与意义

翼状胬肉是一种常见的眼表疾病，其发病率较高，全球翼状胬肉的患病率约为12%，中国40岁以上人群翼状胬肉的患病率约为13.4%，中国将近有1.09亿人患有翼状胬肉。该疾病通常从鼻侧结膜向角膜方向生长，也可双侧发病。翼状胬肉不仅影响美观，还会引发一系列眼部问题。在疾病早期，患者可能会感到眼部有轻微的异物感、烧灼感或刺痛感，还可能伴有流泪等症状。随着病情的发展，翼状胬肉逐渐增大，侵入角膜缘，这不仅会导致角膜散光，还会严重影响视力，甚至导致失明。

目前，翼状胬肉的发病机制尚未完全明确，但研究发现，其发病可能与多种因素有关，包括紫外线照射、病毒感染、氧化应激、炎症介质、抑癌基因突变、增殖与凋亡蛋白的表达、多种生长因子的表达、细胞外基质调节剂和上皮-间充质细胞转化等。在众多与翼状胬肉发病相关的因素中，结缔组织生长因子（CTGF）备受关注。CTGF作为一种富含半胱氨酸的分泌型多肽，属于CCN家族成员。它在多种生理和病理过程中发挥着关键作用，尤其是在细胞增殖、分化、黏附以及细胞外基质合成等方面。在翼状胬肉的发病机制中，CTGF被认为是一个关键的调控因子，其异常表达与翼状胬肉的发生、发展密切相关。研究表明，CTGF能够促进成纤维细胞的增殖和分化，诱导纤维连接蛋白（Fn）和I型胶原（collagenI）等细胞外基质成分的合成，从而导致结膜组织的增生和纤维化，这正是翼状胬肉的重要病理特征。

RNA干扰（RNAi）技术的出现为研究基因功能和疾病治疗提供了新的有力工具。短发夹RNA（shRNA）是一种能够在细胞内被加工成小干扰RNA（siRNA）的分子，通过RNAi机制特异性地降解靶基因的mRNA，从而实现对靶基因表达的有效抑制。将CTGFshRNA应用于翼状胬肉的研究中，有望深入揭示CTGF在翼状胬肉发病机制中的具体作用，为开发新的治疗方法提供理论依据。通过抑制CTGF的表达，可以阻断其对成纤维细胞的增殖和细胞外基质合成的促进作用，从而为翼状胬肉的治疗提供新的靶点和策略。这不仅有助于降低翼状胬肉的复发率，还能为患者提供更有效的治疗方案，改善患者的生活质量。因此，研究CTGFshRNA对人翼状胬肉成纤维细胞中CTGF和胶原表达的影响具有重要的理论意义和临床应用价值。

1.2研究目的

本研究旨在运用CTGFshRNA技术，深入探究其对人翼状胬肉成纤维细胞中CTGF和胶原表达的影响，并进一步阐明其作用机制。具体而言，通过体外实验，将CTGFshRNA转染到人翼状胬肉成纤维细胞中，观察细胞中CTGFmRNA和蛋白表达水平的变化，以及胶原合成的改变。同时，分析相关信号通路的激活情况，以揭示CTGFshRNA发挥作用的分子机制。通过本研究，期望能够为翼状胬肉的发病机制提供新的见解，为开发基于RNA干扰技术的翼状胬肉治疗新方法奠定实验基础，为临床治疗提供更有效的理论支持和潜在的治疗靶点。

二、相关理论基础

2.1翼状胬肉概述

翼状胬肉是一种常见的眼表疾病，主要表现为睑裂部球结膜充血肥厚，逐渐向角膜表面伸展，形成一三角形带有血管组织的胬肉，因其形状酷似昆虫的翅膀而得名。翼状胬肉多发生于鼻侧，颞侧者较少，可单眼或双眼受累。在病变早期，患者一般无明显症状，或仅有眼部的轻度不适，如异物感、烧灼感、刺痛感等，还可能伴有眼睛发红、充血等症状。随着病情的进展，翼状胬肉逐渐增大，侵入角膜缘，会导致角膜散光，引起视力下降。当翼状胬肉进一步发展，遮挡瞳孔区时，会严重影响视力，甚至导致失明。

翼状胬肉的病理特征主要包括以下几个方面：角膜上皮不规则增生，细胞具有强烈的侵袭性和迁移能力，可浸润并替换角膜基质层，导致角膜混浊、遮挡视轴，进而影响视力；角膜基质层被浸润，基质胶原纤维的排列和结构遭到破坏，引起角膜混浊、变性，影响角膜的屈光性能，同时可导致角膜基质细胞活化和增殖，释放各种细胞因子和炎症因子，加重炎症和增殖，还可促使角膜血管生成，形成翼状胬肉血管网，进一步加重角膜的炎症反应和混浊；翼状胬肉组织中存在丰富的血管，这些血管来自角膜缘部的血管网，通过角膜基质延伸至翼状胬肉组织中，血管新生与多种因素有关，如血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）等生长因子的表达和作用，血管新生会加重组织的炎症反应，可能导致角膜水肿、混浊，影响视力；翼状胬肉组织中存在不同程度的炎症反应，包括炎性细胞浸润、细胞因子释放和炎症因子表达等，炎症反应主要由角膜上皮细胞和角膜基质细胞释放的炎性因子引起，如白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤