5-第五章--体内药物分析.pptVIP

药物分析;教学目的与要求;第五章体内药物分析;第五章体内药物分析;第五章体内药物分析;第五章体内药物分析;第五章体内药物分析;分析对象;五、体内药物分析方法;第一节常用体内样品的制备与贮藏;;二、采集和制备;（二）尿样

目的：药物剂量回收，药物清除，药物代谢和生物利用度

特点：浓度高，易于收集，体内代谢研究，应水解分离

采集方法：随时尿、晨尿、白天尿、夜间尿等，定时采集。

贮藏:健康人排出的尿液颜色淡黄至黄褐色,pH在4.8~8.0之间。须加入适当防腐剂后保存。

（三）唾液

唾液中药浓与血浓相关性密切

收集方法濑口15min钟后采集，离心收集;;三、体内样品贮存与处理;1．血样（血浆、血清）及时分离→冷藏，-70℃加入稳定剂NaF;去活性;第二节、体内样品分析的前处理;第二节体内样品分析的前处理;预处理的目的;常用体内样品预处??方法;蛋白质的去除;（一）去除蛋白质方法;（一）去除蛋白质方法;（一）去除蛋白质方法;（一）去除蛋白质方法;（1）优点：①与杂质分离②简便③浓集④提取率高

（2）提取率：在有机相与水相中的溶解度的比值，分配系数，一般少量多次，对生物样品一般一次萃取，70%重现性;（3）影响提取率的因素

①pH碱性药物在碱性pH酸性酸性pH

②提取溶剂相似相溶原理沸点低，不影响检测,性质稳定，不起化学反应(化学惰性）

③离子强度加入中性盐增加离子强度，与水结合强，便于有机溶剂提取;对于离子性特强，水溶性极大的药物，可采用离子对提取

①原理

②应用

阴离子：COOH+SO3H-反离子四丁基铵

阳离子：NH2+反离子烷基或芳基磺酸盐

提取溶剂用量:一般在试管中进行有机相与水相比1:1到5:1;（二）分离与

浓集;用有机溶剂(甲醇)冲洗——洗净;方法好

价格贵;①固相选择样品1ml1ml规格固相1~25ml3ml规格固相

②固相处理

反相C18固定相的6~10倍体积甲醇洗柱，使溶剂化

6~10倍水缓冲液冲洗达分离状态

③上样

④分离用适当的弱溶剂洗涤洗去杂质，通N2干燥固相

⑤洗脱待测物改变pH或极性;（1）流速流速快，按触不充分，样品流失回收率低

柱处理5~10ml·min-1

洗脱0.2~1ml·min-1（〈300mg〉

2~5ml·min-1（300mg）

（2）装样过载突破性试验

已知浓度样品液

①小体积上柱→洗脱回收百分率

②加大体积→洗脱回收百分率

③绘图当回收率下降时为过载;超滤

分离法;（三）缀合物的水解;（四）化学

衍生法;（四）化学

衍生法;（四）化学

衍生法;分析方法的建立;分析方法的建立;分析方法的建立;色谱条件优化;相关术语;;色谱条件优化;色谱条件优化;色谱条件优化;色谱条件优化;色谱条件优化;色谱条件优化;色谱条件优化;二、分析方法的验证;(二)、标准曲线与线性范围;(二)、标准曲线与线性范围;(三)精密度与准确度

(四)定量下限

(五)稳定性

(六)提取回收率

(七)质控样品

(八)质量控制

(九)测定结果;名词解释;名词解释;名词解释;练习;练习;练习;练习;练习;思考题