花青素合成调节基因BiCl对东方百合‘索邦’花色改良的分子机制与实践.docxVIP

花青素合成调节基因BiCl对东方百合‘索邦’花色改良的分子机制与实践

一、引言

1.1研究背景

百合（Liliumspp.）作为百合科百合属的多年生球根花卉，素有“云裳仙子”的美誉，在全球花卉市场中占据着极为重要的地位。其花形优雅独特，或呈喇叭状尽情舒展，或如钟形含蓄内敛；花色更是丰富多样，洁白如雪的纯洁无暇，热情似火的明艳动人，温馨柔和的粉色浪漫，神秘高贵的紫色典雅，还有诸多复色品种，色彩交织，令人目不暇接；花香清幽宜人，芬芳馥郁，沁人心脾，不仅具有极高的观赏价值，还在文化和象征意义上承载着美好寓意，如百年好合、纯洁神圣等，深受人们的喜爱。在全球花卉产业中，百合是重要的切花和盆栽花卉品种之一，广泛应用于鲜切花销售、庭院美化、公园景观布置以及室内装饰等领域，市场需求持续增长。

然而，传统的百合育种方式主要依赖于自然变异、杂交育种等手段，存在周期长、可选择的基因资源有限以及难以打破物种间生殖隔离等诸多问题。例如，通过自然变异获得理想花色突变体的概率极低，往往需要耗费大量的时间和精力去筛选；而杂交育种虽然在一定程度上能够实现基因的重组，但对于一些远缘杂交，常常会面临杂交不亲和、杂种不育等难题，限制了百合品种的创新和改良。

随着现代生物技术的飞速发展，遗传转化技术为百合育种开辟了一条崭新的道路。通过遗传转化，能够将特定的外源基因导入百合细胞中，实现定向改良百合的某些性状，如花色、抗病性、抗逆性等，极大地拓宽了百合育种的范围和潜力，为培育出更多新颖、优质的百合新品种提供了可能。

1.2花青素与百合花色的关系

花青素是一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属于类黄酮化合物，在植物的生长、发育、繁殖以及对环境的适应等过程中发挥着至关重要的作用。它不仅能够赋予植物的花、果实、叶片等器官丰富多样的颜色，吸引昆虫传粉和动物传播种子，有助于植物的繁衍；还具有抗氧化、抗紫外线、抵御病虫害等功能，帮助植物应对各种生物和非生物胁迫。

在百合中，花青素是决定其花色形成和呈现的关键色素之一。百合花色的丰富多样，很大程度上是由于花青素的种类、含量以及在花瓣中的分布模式不同所导致的。不同种类的花青素，如天竺葵色素、矢车菊色素、飞燕草色素等，各自呈现出独特的颜色，天竺葵色素使花瓣呈现橙红色，矢车菊色素赋予花瓣紫红色，飞燕草色素则让花瓣展现出蓝色调。这些花青素在百合花瓣中的相对含量和比例的变化，会使百合呈现出从浅到深、从单一色到复色等各种各样的花色。而且，花青素在花瓣中的分布并非均匀一致，有的集中在花瓣的边缘，形成美丽的镶边；有的分布在花瓣的基部，构成独特的色斑，这些不同的分布模式进一步丰富了百合花色的表现形式。

1.3研究目的与意义

本研究旨在将从玉米中克隆得到的花青素合成调节基因BiCl导入东方百合‘索邦’中，期望通过调控花青素的生物合成途径，改变‘索邦’百合原有的花色，获得具有新颖花色的百合植株。这不仅能够为百合花色改良提供新的技术手段和基因资源，进一步丰富百合的花色类型，满足市场对多样化百合品种的需求；同时，通过研究BiCl基因在百合中的表达调控机制以及对花青素合成途径的影响，有助于深入揭示百合花色形成的分子机理，为百合分子育种提供坚实的理论基础，推动百合育种技术的不断创新和发展。

二、材料与方法

2.1实验材料

2.1.1植物材料

本研究选用的植物材料为东方百合‘索邦’（Liliumorientale‘Sorbonne’）无菌苗。该无菌苗由东方百合‘索邦’的鳞片经组织培养获得。鳞片取自健康、无病虫害且生长状况良好的‘索邦’百合种球。将种球在流水下冲洗干净，去除表面的泥土和杂质，然后用75%酒精浸泡30-60秒进行表面消毒，再用0.1%升汞溶液消毒15分钟，期间不断振荡，以确保消毒彻底。消毒后用无菌水冲洗5-6次，将消毒后的鳞片切成大小约为1cm×1cm的小块，接种到添加了6-BA2.0mg/L和NAA0.2mg/L的MS培养基上进行诱导培养。在温度为（25±2）℃、光照强度为1500-2000lx、光照时间为12h/d的条件下培养，经过一段时间后，鳞片诱导出不定芽，将不定芽切割下来，转接到相同的培养基上进行继代培养，从而获得大量生长健壮、遗传背景一致的‘索邦’无菌苗。

选择东方百合‘索邦’作为实验材料，主要是因为它是东方百合杂交系中非常受欢迎的品种，具有花大、色艳、香味浓郁等特点，在花卉市场上占据重要地位，具有较高的经济价值和观赏价值。同时，‘索邦’百合对组织培养和遗传转化的响应较好，相对容易获得无菌苗和进行遗传操作，有利于实验的顺利开展。

2.1.2菌株与载体

携带BiCl基因的农杆菌菌株为EHA105，该菌株具有侵染能力强、转化效率较高等优点，广泛