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林木人工miRNA设计试题库及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.人工miRNA主要作用于（）

A.DNAB.mRNAC.tRNAD.rRNA

2.设计人工miRNA时首先要确定（）

A.靶基因B.启动子C.终止子D.内含子

3.人工miRNA与靶基因结合是通过（）

A.共价键B.离子键C.碱基互补配对D.范德华力

4.以下哪种软件可用于辅助设计人工miRNA（）

A.PhotoshopB.PrimerPremierC.AutoCADD.Word

5.人工miRNA对靶基因的调控主要是（）

A.促进表达B.抑制表达C.不影响D.随机作用

6.构建人工miRNA载体时常用的工具酶是（）

A.淀粉酶B.蛋白酶C.限制性内切酶D.脂肪酶

7.人工miRNA表达载体转化林木细胞常采用（）

A.浸泡法B.注射法C.农杆菌介导法D.涂抹法

8.设计人工miRNA时，其长度一般为（）

A.10-15bpB.19-25bpC.30-40bpD.50-60bp

9.检测人工miRNA对靶基因调控效果的常用技术是（）

A.凝胶成像B.蛋白质电泳C.荧光定量PCRD.染色

10.人工miRNA发挥作用的主要场所是（）

A.细胞核B.线粒体C.叶绿体D.细胞质

多项选择题（每题2分，共10题）

1.设计人工miRNA需考虑的因素有（）

A.靶基因序列B.miRNA前体结构C.表达载体D.宿主植物

2.人工miRNA的应用领域包括（）

A.林木抗病B.林木抗虫C.调控林木生长发育D.提高木材品质

3.以下属于人工miRNA设计流程的有（）

A.靶基因筛选B.引物设计C.载体构建D.功能验证

4.可用于验证人工miRNA功能的方法有（）

A.基因表达分析B.表型观察C.蛋白含量测定D.酶活性检测

5.选择人工miRNA表达载体时需考虑（）

A.载体的复制原点B.筛选标记C.启动子强度D.多克隆位点

6.影响人工miRNA与靶基因结合效率的因素有（）

A.温度B.离子浓度C.miRNA二级结构D.靶基因丰度

7.人工miRNA与天然miRNA的相同点有（）

A.作用机制B.长度范围C.都由基因编码D.都在细胞核合成

8.优化人工miRNA设计的策略有（）

A.多次筛选靶位点B.优化前体结构C.调整表达水平D.改变碱基组成

9.人工miRNA设计中常用的数据库有（）

A.miRBaseB.NCBIC.TAIRD.Ensembl

10.人工miRNA表达载体转化林木细胞的方法有（）

A.基因枪法B.电击转化法C.农杆菌介导法D.花粉管通道法

判断题（每题2分，共10题）

1.人工miRNA可以随意设计，无需考虑靶基因。（）

2.人工miRNA只能调控一个靶基因。（）

3.设计人工miRNA不需要考虑其在植物体内的稳定性。（）

4.所有林木都适合用相同的人工miRNA表达载体。（）

5.人工miRNA对靶基因的调控是不可逆的。（）

6.构建人工miRNA载体时只需一种限制性内切酶。（）

7.荧光定量PCR可准确判断人工miRNA对靶基因的调控效果。（）

8.人工miRNA的前体结构不影响其功能。（）

9.人工miRNA设计好后无需进行功能验证。（）

10.农杆菌介导法是转化人工miRNA载体最常用的方法。（）

简答题（每题5分，共4题）

1.简述人工miRNA设计的基本步骤。

答：先筛选确定靶基因，然后设计针对靶基因的miRNA序列，接着构建包含该miRNA的表达载体，将载体转化到林木细胞中，最后进行功能验证，检测对靶基因的调控效果。

2.人工miRNA与siRNA有何主要区别？

答：人工miRNA由基因编码，有前体结构，作用于内源基因，通过碱基互补配对识别靶标；siRNA多来自外源双链RNA降解，无特定前体结构，主要对外源基因起作用。

3.选择人工miRN