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广州华南生物工程有限公司
EB病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)说明书
【产品名称】EB病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
【英文名称】DetectionKitforEpstein-BarrVirus(PCR-FluorescenceProbing)
【预期用途】
本试剂盒适用于咽拭子、疱疹液等样品的EB病毒(人类疱疹病毒4型)的特异性检测。检测结果仅供临床
参考,不能单独作为确诊或排除病例的依据。
【检测原理】
本试剂盒采用PCR方法结合荧光探针的扩增检测技术,反应在同一管内连续进行,操作简单,并有效防止了
污染,能对样品中的EB病毒(人类疱疹病毒4型)进行快速检测。
【试剂盒组成】
组分规格24T/盒规格48T/盒
核酸扩增反应液(蓝盖管)1管(400μl)1管(800μl)
EB病毒反应液(紫盖管)1管(50μl)1管(100μl)
EB病毒阳性对照(红盖管)1管(50μl)1管(100μl)
阴性对照(绿盖管)1管(1000μl)1管(1000μl)
PCR酶混液(黄盖管)1管(50μl)1管(100μl)
使用说明书1份1份
注意:不同批号的组分不可以互换使用,试剂盒中组分(包括阳性对照)使用前需完全融化并充分混匀(建议采用轻弹或颠倒的
方式混匀,不建议使用涡旋振荡器混匀),应尽量避免反复冻融!
【储存条件及有效期】
本试剂盒于-20℃保存,有效期为12个月。请于有效期内使用。
【适用仪器】ABI系列,Roche系列,BIO-RAD(含MJ)系列等荧光定量PCR检测仪等。
【样本要求】
样本采集注意无菌操作,采集后应及时检测,也可-20℃保存待测,保存期为4个月;长期保存请置于-70℃。
临床样本在运输和贮存过程中要避免反复冻融,应冷冻运输,运输时要附有必要的信息,如样本编号、发病
日期和样本采集日期。
【检验方法】
1.样本前处理
1.1咽拭子:用消毒棉签涂抹相应部位后迅速保存在3ml病毒保存液中,涡旋振荡10s,5,000rpm离心1min,
取上清备用。
1.2疱疹液:取样本6,000rpm离心1min,取上清备用。
注:为保证样本及检测结果的稳定性,推荐使用HBSS(不含钙、镁离子)作为病原保存液,不建议使用生
理盐水、PBS缓冲液等。
2.样品DNA提取(样本处理区)
可按常规方法提取,也可采用商品化试剂盒提取病毒DNA。本试剂盒阴性对照参与提取,用于对环境进行
监控。阳性对照无需提取,直接使用。
3.反应组分配制
根据不同的PCR仪选择反应管,反应总体积为25μl,反应液与酶在配液区配制,加样在样本处理区,每个测
试反应体系配制如下表:
反应管对照管
检测管
组分阳性对照阴性对照
核酸扩增反应液16μl16μl16μl
EB病毒反应液2μl2μl2μl
PCR酶混液2μl2μl2μl
EB病毒阳性对照
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