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出芽短梗霉双产物发酵特性、工艺优化及多元应用探究

一、引言

1.1研究背景与意义

在生物技术与微生物发酵领域持续发展的当下，微生物多糖以其独特理化性质和广泛应用潜力，成为研究焦点之一。出芽短梗霉（Aureobasidiumpullulans）作为一种极具价值的微生物，能够通过发酵过程联产多种产物，这一特性吸引了众多科研人员和产业界的目光。

聚苹果酸poly（β-L-malicacid）（PMLA）便是出芽短梗霉发酵产物之一，它是一种以L-苹果酸为唯一单体的完全生物可降解性高分子聚合物，具有极佳的水溶性、易修饰性、易代谢性和生物相溶性，是一种具有广阔应用前景的生物学材料，在生物医药领域，可作为药物载体、组织工程支架材料等。

同时，出芽短梗霉发酵还能得到其胞外水溶性多糖普鲁兰。普鲁兰是一种由α-1,4糖苷键连接而成的麦芽三糖重复单位，再通过α-1,6糖苷键连接形成的直链多糖，其分子量分布范围从几千到上百万道尔顿。这种多糖具有诸多优异特性，它极易溶于水，却不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂，在冷水或热水中均可快速溶解，溶解速率远超羟甲基纤维素、羧基纤维素以及淀粉等。在食品包装领域，普鲁兰可直接制备成膜，或喷、涂在物体表面成膜，所形成的膜具有出色的阻氧性、透湿性和高强度，能够有效保鲜、阻氧，被视作制备食品包装可食用薄膜的理想材料；在医药领域，利用普鲁兰制备的胶囊抗冲击能力强，质量稳定，不易脆碎，崩解稳定且不易水解，氧透过率仅为羟丙基甲基纤维素胶囊的1/300，明胶胶囊的1/8，能很好地保护内容物免于氧化，在高品质胶囊的制备中极具优势。

出芽短梗霉发酵联产聚苹果酸和普鲁兰，不仅能够充分利用微生物的代谢能力，提高资源利用率，还能降低生产成本。通过优化发酵条件和调控微生物代谢途径，有望实现两种多糖的高效生产，为相关产业提供丰富的原料来源。在食品工业中，这两种多糖可分别或协同应用于食品保鲜、包装、品质改良等方面，提升食品的安全性和品质；在医药领域，它们可作为药物载体、辅料或具有生物活性的成分，用于开发新型药物和保健品；在化妆品领域，可利用它们的保湿、抗氧化等特性，制备高品质的护肤产品。深入研究出芽短梗霉双产物发酵及其应用，对于推动微生物发酵产业的发展、拓展生物材料的应用范围具有重要的理论意义和实际应用价值。

1.2国内外研究现状

国内外针对出芽短梗霉双产物发酵开展了一系列研究。在发酵工艺方面，众多学者致力于优化发酵条件以提高产物产量。研究不同碳源、氮源以及其他营养成分对出芽短梗霉生长和产物合成的影响，通过正交试验和响应面法等统计方法，确定最佳的培养基配方。同时，对发酵条件如温度、pH值、搅拌速度、通气量等也进行了优化研究，以找到最适合出芽短梗霉生长和产物合成的条件。有研究通过单因素和多因素试验，确定了出芽短梗霉发酵产普鲁兰多糖的最佳发酵工艺参数，使摇瓶发酵生产无色素的普鲁兰多糖产量达到22.9g/L，发酵罐发酵培养产量可达96.4g/L。

在产物分离鉴定方面，主要采用有机溶剂沉淀法和透析法对发酵液中的聚苹果酸和普鲁兰多糖进行分离纯化。利用核磁共振（NMR）和傅立叶红外吸收光谱（FT-IR）对产物进行结构分析，通过凝胶渗透色谱（GPC）测定聚苹果酸的分子量。

在应用研究方面，聚苹果酸与十四烷基三甲基溴化铵（MTAB）通过静电作用生成两亲型梳形复合物PMLA-MTAB，应用透析法制备复合物包载紫杉醇的纳米粒子，有望作为疏水性抗癌药物的新型控释材料。普鲁兰多糖则在食品包装、医药胶囊制备等领域展现出良好的应用效果。

然而，当前研究仍存在一些不足与空白。发酵过程中两种产物的产量和纯度有待进一步提高，代谢调控机制尚不完全明确，发酵工艺的稳定性和可控性也需要优化。此外，对于双产物发酵过程中各因素的交互作用研究较少，在扩大生产规模时，如何保证发酵过程的高效稳定运行还需要深入探索。

二、出芽短梗霉双产物发酵的基础理论

2.1出芽短梗霉概述

出芽短梗霉（Aureobasidiumpullulans）属于半知菌类、芽孢纲、隐球酵母目、隐球酵母科、短梗霉属，是一种具有酵母型和菌丝形态的多型真菌。其细胞形态多样，在不同生长阶段和培养条件下，可呈现出酵母状细胞、菌丝体以及厚垣孢子等多种形态。在幼龄阶段，多以酵母状细胞存在，细胞呈椭圆形至柠檬形，常以多边芽殖的方式进行无性繁殖。随着培养时间延长或环境条件变化，会逐渐形成菌丝体，菌丝有横隔，部分菌丝会断裂成裂生子状的片段。

出芽短梗霉在自然界中分布广泛，常存在于植物材料、土壤、水体以及空气中。它对生长环境具有较强的适应性，能够在多种不同的生态环境中生存和繁衍。在富含糖类的环境中，如水果表面、植物分泌物以及一些含糖量较高的食品中，出芽短梗霉能够利用其中的糖类作为碳