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普通光学显微镜以及显微标本制作
一实验目的
二实验原理
三实验仪器、材料和试剂
四实验内容与方法
五实验报告
实验目的
1.熟悉普通光学显微镜的主要结构和基本性能。
2.掌握低倍镜、高倍镜和油镜的正确使用方法。
3.初步了解光学显微镜的维护方法。
4.了解并掌握简单的显微标本制作技术
实验原理
普通光学显微镜是最通用的一种光学显微镜。利用光线照明,标本中各点依照其光吸收的不同而在明亮的背景中成像。它由物镜、目镜、聚光镜、光源、载物台和支架等部件组成。其中聚光镜用于调节显微镜的照明,物镜和目镜是放大微小物体成像的主要部件。其基本成像原理是:物镜、目镜、聚光镜各自相当于一个凸透镜,被检标本置于聚光器与物镜之间,物镜可使标本在物镜上方形成一个倒立的放大实像。目镜将此倒像进一步放大成像,该虚像看起来好像在离眼睛250mm处。
实验原理
显微标本制作技术是组织学、胚胎学、生理学及细胞学等学科研究观察细胞、组织的生理、病理形态变化的一种主要方法。大多数的生物材料,在自然状态下是不适合显微观察的,也无法看到其内部结构。因为材料较厚,光线不易透过,以致不易看清其结构,另外细胞内的各个结构,由于其折射率相差很小,即使光线可透过,也难以辨明。但在经过固定、脱水、透明、包埋等手续后就可把材料切成较薄的片,再用不同的染色方法就可以显示不同细胞组织的形态及其中某些化学成份含量的变化,就可以在显微镜下清楚地看到其中不同的区域组分状态,切片也便于保存,所以是教学和科研中常用的方法。
实验仪器、材料和试剂
普通光学显微镜、擦镜纸、吸水纸、蒸馏水、载玻片、盖玻片、香柏油、二甲苯、刀片等
实验内容与方法
(一)普通光学显微镜的主要结构
1.机械部分:镜座、镜柱、镜臂、镜筒、转换器、载物台
2.照明部分:反光镜或者光源灯、聚光器、光圈
3.光学部分:目镜、物镜(物镜上的标志:放大倍数、数值孔径、机械筒长、盖片厚度)
实验内容与方法
(二)普通光学显微镜的性能和质量
1.数值孔径
2.分辨力
3.放大率
4.焦点深度
(三)普通光学显微镜的使用方法
1.用前的准备工作
2.低倍镜的使用
3.高倍镜的使用
4.油镜的使用方法
实验内容与方法
(四)本实验室内使用普通光学显微镜的主要注意事项
1.取显微镜时,请尽量小心,防止震动损坏镜头
2.观察带有液体的临时标本时,请务必加盖玻片,以免镜头受污染
3.镜头污染时,请用专业擦镜纸及时擦拭,注意单方向擦拭
4.非观察时候,请将物镜镜头偏离光轴,避免镜头受损
5.非教师授课需要及实验室管理员允许,请勿擅自拆卸零件
6.每位同学本学期固定使用一台显微镜,并做好登记工作;如有问题请及时报告管理员老师
实验内容与方法
3.常用固定剂
(1)包音氏固定液:由苦味酸饱和水溶液、甲醛、冰醋酸配制。
(2)海利氏液:由重铬酸钾、氯化汞、蒸馏水100毫升、甲醛液配制。
(3)卡诺固定液:由纯酒精、冰醋酸配制。
(4)约翰森固定液:由福尔马林、丙酸、50%酒精配制。
实验内容与方法
4.常用染剂
(1)代氏染液
(2)伊红水溶液
(3)番红-固绿对染
(4)苏丹ш染液
实验报告
格式:
一实验目的
二实验原理
三实验仪器、材料和试剂:根据实验所需详实填写
四实验方法和步骤:详细记录
五实验结果与分析:生物绘图、结果描述与分析、注意事项等
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