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厌氧菌的培养方法

物理方法包括遮断空气法、煮沸法、真空法、空气置换法、气体喷射法或转管法等化学方法包括焦性没食子酸法、铁丝绒法、保险粉法等生物学方法包括与需氧菌共生好氧法、燕麦发芽法等混合法包括厌氧罐（袋）法、厌氧手套箱法或厌氧室法、空气置换铁丝绒法、空气置换钯粒法等。2

1液体培养基的厌氧培养法培养基煮沸：驱气后置流水中急速冷却添加还原剂：0.03～0.05％L-盐酸半胱氨酸0.01～0.02％硫乙醇钠0.5～1％葡萄糖0.1％抗坏血酸其它还原剂添加琼脂3

2固体培养基的厌氧培养法厌氧罐法简易厌氧罐和厌氧袋法钢丝绒法焦性没食子酸法抽气换气厌氧培养法生物好氧厌氧培养法转管技术和气体喷射培养法厌氧手套箱法（又称厌氧室法）4

2.1Gas-pak法5

原理111116

厌氧指示剂亚甲基兰指示剂卢卡斯固体厌氧指示剂布鲁氏指示剂7

亚甲基兰指示剂6％葡萄糖水溶液20.1N氢氧化钠水溶液0.10.05％亚甲基兰水溶液0.2厌氧无色残存有氧气蓝色8

大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流9

卢卡斯固体厌氧指示剂2％硼砂溶液5毫升9％硫乙醇酸1毫升酚红溶液0.1～0.2毫升0.02％美兰溶液10毫升琼脂1％厌氧无色残存有氧气蓝色10

布鲁氏指示剂60％羟甲基氨基甲酯14％葡萄糖10.02％美蓝1厌氧无色残存有氧气蓝色11

Gas-Pak罐的使用操作程序平皿培养基装入平皿架中置厌氧罐内；打开内盖居中金属网袋，装入触媒钯粒；打开锡箔纸袋，取出厌氧指示剂片；剪开气体发生袋一角，注入10毫升水，迅速紧闭罐盖，置培养箱中培养。约经5～10分钟后，放入厌氧指示剂片。12

2.2.1简易厌氧罐干燥器容内径（厘米）容器1容器2容器3容积（毫升）硼氢钠氯化钴0.2克柠檬酸0.6克15cm（约2150毫升）或和0.6克钯粒1.5克碳酸氢钠0.7克18cm（约3500毫升）硼氢钠氯化钴0.33克柠檬酸1克或和1克钯粒2克碳酸氢钠1.15克13

2.2.2厌氧袋法聚碳酸酯（复合塑料膜）制厌氧袋产气袋厌氧指示剂触媒14

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2.2.3保险粉的厌氧罐培养法二亚硫酸钠（Na2S2O4）碳酸氢钠无水硫酸钠不用触媒18

2.3钢丝绒法酸性硫酸铜溶液钢(铁)丝绒铜和铁的络合物O2厌氧指示剂19

酸性硫酸铜溶液：将自来水1升加硫酸铜60g，吐温-8020ml，加热溶解后，又加入2N的硫酸90ml，最后加水至6升；方法：取5～6g钢丝绒/L，于1～1.5升酸性硫酸铜溶液浸泡30～60s，钢丝绒变成红铜色，挤