2026届高三生物一轮复习课件-第1课时-基因工程的基本工具和基本操作程序.pptxVIP

基因工程

第1课时基因工程的基本工具和基本操作程序

课标要求1.概述基因工程是在遗传学、微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展而来的2.阐明重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、连接酶和载体三种基本工具3.阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、目的基因导入受体细胞和目的基因及其表达产物的检测鉴定等步骤

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1.基因工程（1）概念理解基因重组受体?遗传性状

（2）基因工程能够实现的理论基础项目理论基础外源基因在受体细胞内表达①基因是控制生物性状的遗传物质的结构和功能单位②遗传信息的传递都遵循中心法则③生物界共用一套遗传密码基因拼接的基本组成单位都是四种脱氧核苷酸分子的复制都遵循碱基互补配对原则③双链分子的空间结构都是规则的双螺旋结构

?（1）“分子手术刀”——限制性内切核酸酶（限制酶）原核生物数千特定核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端

?磷酸二酯键大肠杆菌平末端平末端

（3）“分子运输车”——载体质粒限制酶切割位点

【考点易错】（明辨析）（1）切割质粒的限制性内切核酸酶均能特异性地识别6个核苷酸序列。（）×[解析]大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。（2）若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性内切核酸酶,则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定。（）×[解析]此时该限制酶会对进入该受体细菌的重组质粒进行切割,不利于其保持结构稳定。

?×??×??×?

（6）获取一个目的基因需限制酶切割2次,共产生2个游离的磷酸基团。（）×[解析]限制酶切割2次,共产生4个游离的磷酸基团。

【长句拓展】（练思维）??2.不能直接把目的基因导入受体细胞而要用载体的原因是_______________________________________________________________________________________________________________________。?

3.实践中常用某些病毒载体作为基因工程工具,除具备普通“质粒载体”的条件外,还应具有的条件是_______________________________________________________________________________（答出两点即可）。对靶细胞具有较高的转化效率,不能增殖,对细胞无害，在宿主细胞中引起的免疫反应较弱

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下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是（）?√

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?酶种类作用底物作用部位作用结果限制酶分子磷酸二酯键将切成两个或多个片段连接酶分子片段磷酸二酯键将两个片段连接为一个分子聚合酶脱氧核苷酸磷酸二酯键以单链为模板，将单个脱氧核苷酸依次连接到已有的片段末端[题后归纳]

酶种类作用底物作用部位作用结果解旋酶分子碱基对中的氢键将双链分子局部解旋为单链水解酶分子磷酸二酯键将片段水解为单个脱氧核苷酸（续表）

考点二基因工程的基本操作程序（固本·应用类）

1.目的基因的筛选与获取（1）筛选合适的目的基因①目的基因:在基因工程的设计和操作中,用于改变______________或获得______________等的基因。主要是指____________的基因。受体细胞性状预期表达产物编码蛋白质?结构和功能清晰序列数据库和序列比对工具

③获取目的基因的方法：_______________、__________、构建基因文库。?人工合成??聚合酶链式反应?

⑤条件模板__________原料_______________酶____________________（聚合酶）引物一小段能与________________________互补配对的短单链核酸，需2种引物缓冲液含______（真核细胞和细菌的聚合酶都需要______激活）?4种脱氧核苷酸????

⑥过程两种引物碱基互补配对?

?琼脂糖凝胶电泳

?技术复制场所体外（扩增仪中）细胞内（主要是细胞核内）解旋方式在高温下变性解旋解旋酶催化酶耐高温的聚合酶解旋酶、聚合酶温度条件在较高温度下进行，需控制温度细胞内温和条件合成对象片段分子相同点均需要模板、原料（四种脱氧核苷酸）、能量[重点拓展]

2.基因表达载体的构建（核心步骤）（1）目的：让基因在受体细胞中________________________________。稳定存在、遗传、表达和发挥作用

（2）组成?转录抗生素抗性?

［辨析］区分启动子、终止子、起始密码子、终止密码子项目位置功能启动子（其上有一个重要的位点:聚合酶结合位点）驱动转