六章节外源化学物致突变作用及检测方法.pptVIP

第六章外源化学物的致突变

作用及检测方法;第一节概述;生物变异的原因：

父母本杂交产生子体,由于重组而发生

基因突变而发生

生物的染色体组成或细胞质发生变化而带来

;3.突变(mutation)：遗传结构本身的变化及引起的变异。

1)自发突变(spontaneousmutation)

2)诱发突变(inducedmutation)

4.遗传毒理学(genetictoxicology):它是研究化学性和放射性物质的突变作用以及人类接触致突变物可能引起的健康效应。;5.致突变作用(mutagenesis):广义概念是外来因素,特别是化学因子引起细胞核中的遗传物质发生改变的能力,而且此种改变可随同细胞分裂过程而传递。

6.致突变物(mutagen):能够引起突变的物质。

;;内互换;三、非整倍体和多倍体

非整倍体和多倍体的细胞的染色体数目是不同于正常的细胞染色体数目。

非整倍体(aneuploidy)：指增加或减少一条或几条染色体;

多倍体(polyploidy)：指染色体数目成倍增加。;;第三节化学毒物致突变作用的机理及后果;1.二聚体的形成

2.DNA加合物形成

3.DNA-蛋白质交联物形成

;生化机理研究情况：

1.与微管蛋白二聚体结合

2.与微管蛋白二聚体结合

3.已组装好的微管的破坏

4.中心粒移动受阻

5.其它作用;(一)生殖细胞突变

1.遗传病

2.增加下一代基因库的遗传负荷

基因库:指某一物种在特定时期中能将遗传信息传至下一代的处于生育年龄的群体所含有的基因总和。

遗传负荷：指一种物种的群体中每一个携带的可遗传给下一代的有害基因的平均水平。;3.生殖毒性:胚胎死亡,畸胎,胚胎功能不全及生长迟缓

(二)体细胞突变

肿瘤、衰老、动脉粥样硬化及致畸等,最受注意的是肿瘤。

;第四节机体对致突变作用的影响;第五节致突变作用的检测方法;国际环境致突变物致癌物防护委员会(ICPEMC)于1983年提出致突变试验的遗传学终点分为5类:

①DNA完整性的改变(形成加合物,断裂,交联);

②DNA重排或交换;

③DNA碱基序列改变;

④染色体完整性改变;

⑤染色体分离改变。

其中③实际上指基因突变,④指染色体畸变。;2.选成套观察项目的原则

①选择的遗传毒性试验应包括5种类型的遗传学

终点。

②应??括多种进化程度不同的物种,如原核细胞,

低等和高等真核细胞。

③体内试验与体外试验配合。

④应包括生殖细胞和体细胞。

;二.常用的致突变试验;(二)微核试验(micronucleustest,MNT)

原理：

;;;(三)染色体畸变分析(chromosomeaberrationanalysis)

观察在受试物作用下，中期相细胞染色体形态结构和数目的改变。

哺乳动物试验

小鼠骨髓细胞染色体畸变试验

小鼠睾丸细胞染色体畸变试验

体外试验：;(四)姐妹染色单体交换试验(sister-chromatidexchange,SCE)

指染色体同源座位上DNA复制产物的相互交换,其频率与DNA断裂和修复有关。;原理：;;姐妹染色单体交换试验方法：

体内试验

体外试验;(二)体外试验的活化系统

1.哺乳动物细胞介导

2.S9

3.纯化酶和基因工程

（三）致突变试验与致癌试验的关系

（四）试验结果在毒理学安全性评价中的作用;四、观察方法的新进展

1.转基因小鼠致突变检测系统

2.微核自动化检测技术

3.荧光原位杂交技术