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病毒滴定技术试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每小题2分，共20分。请将正确选项字母填在题干后的括号内）

1.病毒滴定技术的核心目的是测定什么？

A.病毒的基因组大小

B.病毒的致病力强弱

C.单位体积病毒悬液中含有的病毒颗粒（或感染性单位）数量

D.病毒复制所需的特定营养物质

2.TCID50代表什么含义？

A.50%细胞产生病变时的病毒稀释倍数

B.50%病毒感染细胞时的病毒稀释倍数

C.能引起50%接种细胞产生典型细胞病变的含有病毒的最低稀释液浓度

D.病毒感染细胞后50%发生裂解的现象

3.在进行病毒滴定实验前，培养细胞通常需要经过什么处理？

A.用高浓度血清刺激

B.去除所有细胞外基质

C.用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化，去除旧培养液

D.用抗生素长期处理以防止污染

4.接种病毒悬液到细胞培养板后，通常需要设置多少个稀释梯度？

A.2-3个

B.4-5个

C.6-10个

D.10个以上

5.判断细胞是否因病毒感染而病变的主要依据是？

A.细胞是否快速增殖

B.细胞是否聚集在一起

C.细胞形态发生的变化（如变圆、脱落、融合等）

D.培养液颜色是否变深

6.当使用作图法计算TCID50时，通常绘制的是以下哪个图的曲线？

A.稀释倍数vs.细胞数量

B.稀释倍数vs.出现CPE的孔数

C.稀释倍数的对数vs.出现CPE的孔数的百分比

D.病毒滴度（TCID50/mL）vs.实验日期

7.以下哪项操作通常不会影响TCID50测定结果的准确性？

A.细胞培养瓶放置方向不正确

B.病毒悬液稀释过程中出现气泡

C.细胞传代次数过多导致状态不佳

D.实验操作人员佩戴了无菌手套

8.与TCID50法相比，使用实时荧光定量PCR（qPCR）法测定病毒载量的主要优势之一是？

A.操作步骤更简单

B.能直接测定病毒颗粒数

C.不受细胞状态和裂解的影响，灵敏度更高

D.结果以感染性单位表示

9.在生物安全实验室进行病毒滴定实验时，属于一级生物安全防护措施的是？

A.使用生物安全柜

B.对实验人员进行定期体检

C.在开放式台面上进行所有操作

D.对产生的废弃物进行高压蒸汽灭菌

10.病毒滴定结果通常用哪个单位表示？

A.PFU/mL

B.TCID50/mL

C.genomecopies/mL

D.OD值/mL

二、填空题（每空2分，共20分。请将答案填在横线上）

1.病毒滴定中最常用的细胞病变效应是__________。

2.计算TCID50时，若系列稀释的终浓度分别为10??,10??,10??,10?3,10?2,10?1，其中10??稀释度组有50%的孔出现CPE，10?3稀释度组有90%的孔出现CPE，10?2稀释度组全部孔出现CPE，则TCID50约为__________（用10的负次方幂表示稀释倍数）。

3.为了减少实验误差，病毒接种和细胞观察应在__________条件下进行。

4.影响病毒滴定结果准确性的重要因素之一是__________的质量和状态。

5.使用胰蛋白酶消化细胞时，通常需要加入少量血清来__________。

6.病毒滴定技术可用于__________、__________和__________等多种场景。

7.在TCID50计算中，ln(-log?P)法是基于__________原理。

三、名词解释（每题4分，共16分）

1.病毒滴度

2.细胞病变效应（CPE）

3.系列稀释法

4.生物安全等级

四、简答题（每题6分，共18分）

1.简述TCID50法测定病毒滴度的基本步骤。

2.列举至少三个可能影响TCID50测定结果准确性的因素。

3.简要说明在病毒滴定实验中，维持细胞培养液无菌的重要性。

五、计算题（8分）

已知在TCID50实验中，设置如下稀释梯度：10?3,10??,10??,10??,10??,10??。接种后，在37°C培养48小时，观察结果如下：10?3组全组CPE；10??组5/6孔CPE；10??组3/6孔CPE；10??组0/6孔CPE；10??组0/6孔CPE；10??组0/6孔CPE。请用