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分子生物学（杨建雄）

第一章绪论

分子生物学

概念

广义：在分子水平上研究生命现象，或用分子的术语描述生物现象的学科

侠义：在核酸与蛋白质水平上研究基因的复制，基因的表达和调控，及基因的突变与交换的分子机制

研究内容：

①以某物种全套基因表达产物的结构和功能

②基因传递和表达的途径

③基因表达的调控

三大原则

①构成生物大分子的单体是相同的——共同的核酸语言（Nt）、共同的蛋白质语言

②生物遗传信息的表达的中心法则相同

③生物大分子里面，单体（核苷酸、氨基酸）的排列是不同的

分子生物学的兴起

①Mendel豌豆杂交实验

总结了基因的分离定律和自由组合定律

表明生物的遗传性状是由独立的遗传因子决定，这些遗传因子后来被称作基因

②遗传的染色体学说，染色体是基因的载体

证实：1910年Morgan利用果蝇进行遗传学实验发现了基因的连锁规律

③“一个基因一个酶”假说

1941年GeorgeBeadle和EdwardTatum以红色面包霉为研究对象

④核素1869年瑞士Miescher

他的学生Altmann提出了核酸的概念

⑤1910年德国Kossel首次分离得到单核苷酸，并阐明核酸的主要成分是核糖、磷酸和碱基

⑥1924年德国Feulgen发现核酸中的糖有核糖和脱氧核糖两种，并根据核酸所含核糖的不同，将核酸分为核糖核酸和脱氧核糖核酸

⑦1929年Kossel学生Levine发现核酸中的碱基主要是腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶。还证明核酸是由核苷酸组成的，而核苷酸是由碱基、核糖、磷酸组成的

⑧1944年Avery通过肺炎链球菌转化实验证明基因是由DNA构成的

1952年Hershey和Chase利用噬菌体感染细菌实验，证实了DNA是遗传物质

⑨1950年Chargaff指出DNA中四种碱基的比例关系：A/T=G/C=1

⑩1953年Watson和Crick提出DNA双螺旋结构模型（分子生物学兴起的标志）

分子生物学的发展

关于基因的复制

1958年Meselson和Stahl同位素实验证实DNA复制的半保留机制

1956年ArthurKornberg等首先在大肠杆菌中发现了DNA聚合酶Ⅰ

1989年Greider等发现端粒酶是以内源性RNA为模板的逆转录酶

关于基因的转录

1955年Brachet洋葱根尖和变形虫实验、Hall和SpiegelmanT2噬菌体DNA-RNA杂交实验证实蛋白质合成模板是RNA；

1958年Crick提出著名的中心法则

1960年Weiss和Hurwitz发现RNA聚合酶

关于基因的翻译

1954年Gamow推测遗传密码是三联体

1961年Crick，Barrett和Brenner等用插入和缺失突变证实了遗传密码是三联体

Nirenberg和Khorana破译遗传密码

关于基因表达的调控

1961年Jacob和Monod提出基因表达的操纵子学说

1976年Tonegawa发现免疫球蛋白的体细胞重组机制

......

基因过程的兴起

1964年Holliday提出了DNA重组模型

DNA连接酶、逆转录酶、限制性内切核酸酶等

加速分子生物学发展进程的一项“简单而晚熟”技术

聚合酶链反应（PCR）技术1985年Mullis

核酸的结构和功能

DNA是主要的遗传物质

1869年瑞士Miescher从细胞核中分离出含磷很高的酸性化合物，称为核酸

1889年他的学生Altmann提出了核酸的概念

1910年德国Kossel首次分离得到单核苷酸，并阐明核酸的主要成分是核糖、磷酸和碱基

1924年德国Feulgen发现核酸中的糖有核糖和脱氧核糖两种，并根据核酸所含核糖的不同，将核酸分为核糖核酸和脱氧核糖核酸

1929年Kossel学生Levine发现核酸中的碱基主要是腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶。还证明核酸是由核苷酸组成的，而核苷酸是由碱基、核糖、磷酸组成的

1944年Avery通过肺炎链球菌转化实验证明基因是由DNA构成的

1952年Hershey和Chase利用噬菌体感染细菌实验，分别用35S标记噬菌体T2的蛋白质，用32P标记噬菌体T2的DNA。进一步证实了DNA是遗传物质

核酸的组成成分

核酸

核酸

核苷酸

磷酸

核苷

戊糖

含氮碱基

比较

戊糖

含氮碱基

合成的直接原料

DNA

D-2-脱氧核糖

腺嘌呤A

鸟嘌呤G

胞嘧啶C

胸腺嘧啶T

脱氧核苷三磷酸（dATP,dGTP,dCTP,dTTP）

RNA

D-核糖

腺嘌呤A

鸟嘌呤G

胞嘧啶C

尿嘧啶U

核苷三磷酸（ATP,GTP,CTP,UTP）

核苷

连接方式：

核糖的1’碳原子通常与嘌呤碱的第9位氮原子或嘧啶碱的第1位氮原子相连

在tRNA