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观察叶片的结构实验报告

一、实验名称

观察叶片的结构

二、实验目的

1.认识叶片的基本外部形态和内部解剖结构。

2.识别叶片表皮、叶肉(栅栏组织与海绵组织)及叶脉等主要结构。

3.理解叶片各部分结构与其功能的适应性。

4.掌握徒手切片技术及显微镜的规范操作方法。

三、实验原理

叶片是植物进行光合作用和蒸腾作用的主要器官,其形态结构与其生理功能密切相关。通过徒手切片的方法,可以获得叶片的横切面薄片,经染色处理后,在光学显微镜下能够清晰观察到表皮细胞、保卫细胞(及气孔)、栅栏组织细胞、海绵组织细胞以及叶脉中的维管束等结构。不同的细胞类型因其形态、排列方式和内含物的不同,在显微镜下呈现出各异的特征,有助于我们理解其特定功能。

四、实验材料与用具

1.实验材料:选取生长健壮、叶片较薄且质地较柔韧的植物新鲜叶片(如蚕豆叶、菠菜叶、紫鸭跖草叶等,本次实验选用蚕豆叶)。

2.实验用具:光学显微镜、载玻片、盖玻片、刀片(或双面刀片)、培养皿(内盛清水)、毛笔、镊子、滴管、吸水纸、解剖针、纱布、清水、稀碘液(或中性红染液)。

五、实验步骤

1.叶片的外部形态观察:取新鲜完整的蚕豆叶,置于解剖盘中,观察其形状、叶缘、叶尖、叶基以及叶片的正反面颜色差异。注意识别叶片、叶柄和托叶(若有),并用肉眼或放大镜观察叶片表面是否有绒毛、气孔等特征。

2.徒手切片的制作:

*取材:取蚕豆叶片中部较宽的部分,切取约0.5cm宽的窄条(若叶片较厚,可只取叶片的一部分,避开主脉)。将此窄条平放在载玻片中央,或夹在两小块软木片(或白萝卜块)之间,使切面露出。

*切片:左手拇指和食指(或借助软木片)捏紧叶片材料,右手持刀片,刀口向内,与材料切面保持平行或成一定角度,以均匀的力量、快速的动作进行切割。切片过程中,可不时将刀片在清水中蘸一下,以保持刀口湿润并冲去切片。

*选片:将切下的薄片轻轻放入盛有清水的培养皿中。用毛笔挑选其中最薄、最完整的切片,将其移至载有清水的载玻片中央。

3.临时装片的制作:

*展平:用解剖针轻轻将切片在水中展平,避免折叠。

*染色(可选):若切片透明度较高,结构不易分辨,可在切片一侧滴加1-2滴稀碘液,数分钟后用吸水纸从另一侧吸去多余染液,再滴加清水洗去浮色。

*盖片:用镊子夹起盖玻片,使其一侧先接触载玻片上的水滴,然后缓缓放下,避免产生气泡。如有气泡,可轻压盖玻片赶出,或在盖玻片一侧滴加清水,另一侧用吸水纸吸引,使气泡随水流排出。用吸水纸吸去盖玻片周围多余的水分。

4.显微镜观察:

*低倍镜观察:将制作好的临时装片放在显微镜的载物台上,用压片夹固定。转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直至物镜接近玻片标本(此时眼睛应从侧面注视物镜,以免压碎玻片或损伤镜头)。左眼向目镜内看,同时反向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。移动装片,寻找切片最薄、结构最清晰的区域。在此视野下,可观察到叶片横切面的整体结构,识别表皮、叶肉和叶脉的大致位置和轮廓。

*高倍镜观察:在低倍镜下找到清晰的观察目标后,将其移至视野中央。转动转换器,换上高倍物镜。调节细准焦螺旋,使物像更加清晰。仔细观察叶片各部分的细微结构:

*表皮:观察上、下表皮细胞的形态、排列特点,是否有角质层(染成浅色透明层)。注意寻找由两个半月形保卫细胞围成的气孔,观察其分布(以上表皮还是下表皮为多)。

*叶肉:区分栅栏组织和海绵组织。观察栅栏组织细胞的形态、排列方式、细胞层数及叶绿体含量;观察海绵组织细胞的形态、排列方式、细胞间隙大小及叶绿体含量。

*叶脉:观察叶脉中维管束的结构,识别木质部(通常细胞壁较厚,染成深色,靠近上表皮)和韧皮部(细胞壁较薄,颜色较浅,靠近下表皮)。

5.绘图与记录:绘制所观察到的叶片横切面结构图,并标注各主要结构名称(如:上表皮、下表皮、角质层、保卫细胞、气孔、栅栏组织、海绵组织、叶脉、木质部、韧皮部等)。同时,记录观察到的各结构的主要特征。

六、实验结果与分析

1.叶片外部形态:所观察的蚕豆叶呈阔卵形,叶缘全缘,叶尖钝圆,叶基楔形。叶片正面颜色深绿,背面颜色浅绿。用放大镜可观察到叶片背面有较多细小的点状结构(推测为气孔)。

2.叶片横切面结构(显微镜下观察):

*表皮:由一层排列紧密、无细胞间隙的扁平细胞构成。上表皮细胞外覆有一层明显的角质层,具有光泽。下表皮细胞的角质层相对较薄。在上下表皮中均观察到气孔,但下表皮的气孔数量明显多于上表皮。气孔由两个呈半月形的保卫细胞组成,保卫细胞内含叶绿体,中央有一空隙为气孔腔。

*叶肉:位于上下表皮之间,细胞内富含叶绿体,是光合作用的主要场所。叶肉明显分为两部分:

*栅栏组织:靠近上表皮,由1-

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