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基于分子遗传学的侧耳属系统解析与精准鉴定研究

一、引言

1.1研究背景与意义

侧耳属（Pleurotus）隶属于担子菌门（Basidiomycota）、层菌纲（Hymenomycetes）、伞菌目（Agaricales）、侧耳科（Pleurotaceae），是一类与人类关系紧密且具有重要经济价值的大型真菌。其在食用、药用等领域展现出了极高的价值，在全球范围内受到广泛关注。

在食用方面，侧耳属是世界上重要的栽培食用菌之一，产量在世界食用菌总产量中名列前茅，也是我国栽培食用菌的主要核心成员。例如，平菇（糙皮侧耳，Pleurotusostreatus）作为全球性栽培种类，以其味美价廉而深受消费者喜爱，是人们日常饮食中常见的菌菇食材。金顶侧耳（榆黄蘑，Pleurotuscitrinopileatus）颜色鲜黄，貌似花朵，味道鲜美；白灵侧耳（阿魏菇，Pleurotusnebrodensis）肉质细腻肥厚，味道鲜美独特；刺芹侧耳（杏鲍菇，Pleurotuseryngii）香味浓郁似杏仁，味道鲜美如鲍鱼，菌肉肥厚，质地脆嫩口感极佳，是目前我国市场占有率较广且受欢迎的高档食用菌。这些侧耳属真菌不仅口感独特，还含有丰富的营养成分，如高质量的蛋白质、膳食纤维（主要是β-葡聚糖）、多种维生素和矿物质等，能够为人体提供必要的营养支持。其中，平菇的氨基酸评分（AAS）满足所有必需氨基酸，符合成人的营养需求，其还含有粗纤维和β-葡聚糖，分别为10.3%和25.9%，是优质的营养来源。

从药用角度来看，侧耳属真菌具有多种药用活性。研究表明，侧耳属中的一些种类含有具有抗癌活性的多糖，如从糙皮侧耳中提取的侧耳酸性多糖，热水提取物对肉瘤S180的抑制率为91%，其含有的β-1，3-葡聚糖69%，半乳糖13%，甘露糖6%，葡萄糖醛酸13%，后三者均以侧链存在于多糖结构中。此外，糙皮侧耳中提取出的一种糖蛋白体外对S180、腹水瘤ECA、肝癌Hepa及人B淋巴瘤细胞Raji、白血病细胞K562有较强的细胞毒作用，且对不同癌细胞有选择性，体内试验表明，该组分有抑制小鼠S180瘤细胞增殖和向周围组织侵袭的作用，能使瘤组织坏死，淋巴细胞浸润，并形成较厚的纤维包膜，提示其具有使肿瘤组织纤维化的作用。侧耳属真菌还具有增强免疫、降血脂及防治动脉粥样硬化等功效。从糙皮侧耳真菌分离的糖肽组分，具有促进淋巴因子激活杀伤（LAK）细胞和自然杀伤（NK）细胞杀伤肿瘤的作用；侧耳用水及不同浓度乙醇提取浸膏，真空干燥后，以3%醇浸膏加于仓鼠高脂饲料中，6星期后，水及30%和60%乙醇提取的浸膏，可明显减轻血清及肝胆固醇和三醚甘油（甘油三酯）。

然而，长期以来，侧耳属的分类主要依赖传统的分类方法，即根据菌体的外部形态特征对菌体进行分类。这种方法虽然具有一定的直观性，其优点在于外部形态特征是由多基因控制，但也存在明显的局限性。由于侧耳属真菌的子实体形态受环境条件影响较大，具有极大的可塑性，在不同的生长环境下，同一物种可能表现出不同的形态特征，这就导致按照形态特征分类时出现较多的同物异名或同名异物现象。近200年来，侧耳属描述的分类单元超过1,000个，但实际上世界上被广泛认可的种类约有20种（kirk等人，2008），大量的无效分类单元给侧耳属的研究和应用带来了诸多困扰。

随着分子生物学和生物信息技术的飞速发展，分子系统学和分子鉴定技术应运而生。分子系统学基于分子遗传学原理，通过分析生物大分子（如DNA、RNA和蛋白质）的序列变异来推断生物类群之间的亲缘关系和进化历史；分子鉴定则是利用特定的分子标记对物种进行准确识别和分类。这些方法具有高度的准确性和敏感性，可以避免传统分类技术的局限性。将分子系统学及分子鉴定应用于侧耳属分类研究，能够从基因层面揭示侧耳属物种之间的遗传差异和亲缘关系，有助于更准确地识别侧耳属菌株，澄清侧耳属复杂的分类和系统发育关系，从而加深对侧耳属的了解，为侧耳属资源的合理利用和开发提供坚实的理论基础，推动侧耳属在食用、药用、生物资源研究等领域的进一步发展。

1.2国内外研究现状

在国外，侧耳属分子系统学和分子鉴定的研究开展较早。20世纪90年代，Vilgalys和Sun就利用分子生物学技术对侧耳属进行了研究，开启了侧耳属分子系统学研究的先河。此后，众多学者围绕侧耳属的分子系统发育关系展开了深入探讨。Thorn等人通过对具有单型菌丝的侧耳科侧耳型真菌物种进行系统发育分析，研究了其系统发育以及地理分布关系。分子标记的选择上，核糖体DNA（rDNA）的部分序列成为国际公认的较为理想的系统发育标记。其中，rDNA的转录间隔区（InternalTra