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生物安全柜操作规程与注意事项

在现代生物实验室中，生物安全柜是保护操作人员、实验环境以及实验材料免受生物危害的核心设备。其正确使用与规范操作，直接关系到实验室生物安全的整体把控。本文旨在详细阐述生物安全柜的标准操作规程及关键注意事项，为实验室人员提供一份实用且严谨的操作指南。

一、操作前准备

在启动生物安全柜进行任何实验操作之前，充分的准备工作是确保安全与效率的基础。首先，应检查生物安全柜的运行状态指示灯是否正常，确认电源连接稳固。随后，需开启风机，让其运行至少几分钟，以确保柜内气流稳定并将残留污染物排出。同时，紫外灯的消毒程序也应在操作前完成，但务必注意，紫外灯仅能对暴露表面进行消毒，且在人员进入操作区域前必须关闭，避免对眼睛和皮肤造成伤害。

柜内的清洁与整理同样不容忽视。操作前，应用适宜的消毒剂（通常为75%乙醇）擦拭生物安全柜内的工作台面、侧壁及后壁。确保柜内仅放置实验必需的仪器与耗材，避免无关物品占用空间，影响气流循环。所有放入柜内的物品，其表面也应进行消毒处理。同时，应规划好柜内物品的摆放位置，常用物品置于易于拿取的区域，产生气溶胶的操作应尽可能远离前窗开口和高效空气过滤器（HEPA）的出风口。

操作人员自身的准备也至关重要。必须穿着合适的个人防护装备，包括实验服、手套、护目镜或面罩等，具体防护级别应根据实验所涉及生物因子的危害程度来确定。

二、操作中规范

当生物安全柜启动并完成前期准备后，即可开始进行实验操作。操作人员应保持正确的坐姿，使面部位于安全柜前窗开口的下方，以确保负压气流的有效保护。操作过程中，手臂进出安全柜时应缓慢，避免在柜门口形成剧烈的气流扰动，从而防止柜外空气进入或柜内污染空气溢出。

在柜内进行操作时，动作应轻柔、平稳，避免快速移动或挥舞手臂，以免破坏层流气流。所有操作，尤其是可能产生气溶胶的步骤（如离心管开盖、混匀、移液等），均应在工作台面的中后部区域进行，远离前窗和后壁的格栅。使用移液管时，应避免用力吹吸，以防液体飞溅。若进行接种、划线等操作，灼烧接种环或针后，需待其充分冷却再接触生物材料，避免产生气溶胶和破坏材料活性。

操作过程中，应时刻关注柜内压力指示或气流状态指示灯，如发现异常，应立即停止操作，撤离柜内物品（若安全），并报告实验室管理人员进行检查。同时，避免在操作时打开生物安全柜的玻璃视窗至高于规定的安全高度，通常这个高度会有明确标识。

三、操作后处理

实验操作完成后，并非意味着可以立即离开。正确的收尾工作是防止污染扩散的关键环节。首先，应将实验产生的所有生物废弃物妥善收集，放入指定的、带有生物危害标识的垃圾袋或容器中，并进行初步消毒处理，然后移出安全柜。对于使用过的实验器材，如培养皿、试管等，也应进行相应的消毒或灭菌处理后再移出。

随后，需再次用75%乙醇或其他合适的消毒剂彻底擦拭生物安全柜的工作台面、侧壁、后壁及可能被污染的设备表面。擦拭时应遵循一定的顺序，确保无遗漏区域。完成清洁后，让生物安全柜的风机继续运行一段时间（通常建议至少10-15分钟），以确保将柜内残留的气溶胶和污染物彻底排出。

最后，关闭生物安全柜的风机电源。若后续较长时间不再使用，可按照规定程序开启紫外灯进行再次消毒，但同样要确保消毒结束后关闭紫外灯，并在下次使用前通风。

四、注意事项

除了上述操作流程外，以下注意事项需要实验室人员时刻铭记：

1.个人防护的强化：即使在生物安全柜内操作，个人防护装备也不可松懈。手套应在操作过程中保持完好，若有破损或污染应立即更换。操作结束后，脱卸个人防护装备的顺序和方法也需规范，避免自身污染。

2.物品摆放与操作习惯：柜内物品摆放应遵循“由清洁区到污染区”的原则，避免交叉污染。操作时，禁止在安全柜内书写记录，必要时可将记录纸放在柜外，通过观察窗记录。禁止在安全柜内饮食、吸烟或进行其他与实验无关的活动。

3.对安全柜性能的持续关注：生物安全柜的定期维护和检测是确保其性能达标的关键。实验室应按照规定周期请专业人员对HEPA过滤器的完整性、气流速度、气流模式等进行检测。日常使用中，如发现风机异响、玻璃视窗密封不良等情况，应立即停止使用并报修。

4.气溶胶的高度警惕：任何可能产生气溶胶的操作都必须在生物安全柜内进行，并且要采取额外的防护措施，如使用密封的离心管、在有盖的容器内进行混匀等。

5.化学品的使用限制：除非特别注明，否则不应在生物安全柜内使用易挥发的有毒化学品或放射性物质，因为这些物质可能会损坏HEPA过滤器，或通过排风系统造成环境危害。

6.培训与授权：所有使用生物安全柜的人员必须经过严格的操作培训和考核，熟悉所使用安全柜的型号、性能及操作规程，未经授权不得擅自操作。

五、日常维护与保养

为确保生物安全柜的长期稳定运行，日常的维护保养不可或缺。这包括：定期清洁