解析朱砂叶螨miRNA：敏感与抗药性品系的分子差异与调控机制.docxVIP

解析朱砂叶螨miRNA：敏感与抗药性品系的分子差异与调控机制

一、引言

1.1研究背景

朱砂叶螨（Tetranychuscinnabarinus），俗称“红蜘蛛”，隶属蛛形纲蜱螨目叶螨科，是一种全球性分布的重要农业害螨。其寄主范围极为广泛，能危害包括蔬菜、果树、花卉、粮食作物等在内的超过1200多种植物。在蔬菜领域，茄子、辣椒、马铃薯及瓜类、豆类、葱蒜类等蔬菜常受其害；果树方面，柑橘、苹果等深受其扰；花卉中，月季等也难以幸免。朱砂叶螨主要以成螨、若螨群集于叶片背面，通过刺吸式口器吸食植物汁液，导致叶片出现黄白色斑点，严重时叶片枯黄脱落，光合作用受到抑制，蒸腾作用异常增强，植株生长发育受阻，进而造成农作物产量大幅下降，品质显著降低，严重时甚至能导致减产50%以上，给农业生产带来了巨大的经济损失。

长期以来，化学防治因其高效、快速等特点，成为控制朱砂叶螨的主要手段。然而，随着化学杀螨剂的大量、频繁使用，朱砂叶螨的抗药性问题日益严峻。据相关研究表明，朱砂叶螨已对有机磷类、拟除虫菊酯类、有机氯类等多种传统杀螨剂产生了不同程度的抗药性。例如，拟除虫菊酯类药剂作为防治朱砂叶螨的常用产品之一，由于使用年限较长，朱砂叶螨已对其产生了严重的靶标抗性。抗药性的产生使得杀螨剂的防治效果大打折扣，为了达到相同的防治效果，不得不增加用药剂量和用药次数，这不仅提高了生产成本，还加剧了环境污染，对生态平衡造成了严重破坏。

微小RNA（microRNA，miRNA）是一类长度约为21-25个核苷酸的内源性非编码单链RNA分子，广泛存在于真核生物中。miRNA通过与靶mRNA的互补配对结合，在转录后水平对基因表达进行调控，参与生物体的生长发育、细胞分化、代谢调节、免疫应答等诸多生物学过程。在害虫抗药性领域，miRNA的研究逐渐成为热点。已有研究表明，miRNA在昆虫和螨类对杀虫剂的抗性形成过程中发挥着重要作用，它们可以通过调控解毒酶基因、靶标基因以及表皮蛋白基因等的表达，影响害虫对杀虫剂的解毒能力、靶标敏感性以及药剂穿透性，从而介导害虫抗药性的产生和发展。深入研究miRNA在朱砂叶螨抗药性中的作用机制，对于揭示朱砂叶螨抗药性的分子机制、开发新型抗药性监测技术以及制定更加有效的抗药性治理策略具有重要的理论和实践意义。

1.2研究目的与意义

本研究旨在通过高通量测序技术结合生物信息学分析，全面、系统地鉴定朱砂叶螨中的miRNA，并深入分析这些miRNA在朱砂叶螨敏感品系和抗药性品系中的表达差异。通过对差异表达miRNA的功能预测和验证，初步探究其在朱砂叶螨抗药性形成过程中的作用机制。

本研究成果具有重要的理论意义，有望丰富和完善朱砂叶螨抗药性的分子机制理论体系，为深入理解节肢动物抗药性进化提供新的视角和理论依据。在实际应用方面，研究结果有助于开发基于miRNA的新型抗药性监测分子标记，提高抗药性监测的准确性和时效性，为田间朱砂叶螨的抗药性治理提供科学依据；同时，也为研发以miRNA为靶标的新型绿色杀螨剂奠定基础，推动农业害虫绿色防控技术的发展，对于减少化学杀螨剂的使用、降低环境污染、保障农产品质量安全以及维护生态平衡具有重要的现实意义。

二、朱砂叶螨概述

2.1生物学特性

朱砂叶螨个体微小，雌成螨体长约0.42-0.50毫米，椭圆形，体色通常为锈红色或深红色，体背两侧各具一对明显的黑斑，呈倒“山”字形，背毛26根，有4对足；雄成螨体型相对较小，体长约0.26-0.35毫米，体后部尖削，体色常为绿色或橙黄色。其卵呈圆球形，直径约0.13毫米，初产时无色透明，随着胚胎发育，孵化前变为微红色。幼螨近圆形，体长约0.05毫米，浅红色且稍透明，足3对。若螨体型较幼螨大，足4对，体色变深，体侧出现明显的块状色素。

在适宜的环境条件下，朱砂叶螨的生活史较短。在北方地区，一年可发生12-15代，南方地区则多达18-20代。以受精的雌成螨在树皮裂缝、杂草根际、土缝隙或枯枝落叶下等场所越冬。翌年春季，当气温回升至适宜温度（一般在10℃以上），枣树萌芽时，越冬雌成螨开始出蛰活动，先在田边杂草上取食、繁殖1-2代，之后逐渐迁移至农作物上为害。其繁殖能力极强，除两性生殖外，还具有孤雌生殖习性。在适宜条件下，雌成螨一生可产卵50-150粒，卵多散产于叶片背面，产卵前期通常为1天。在温度为24℃时，卵的发育历期约为3-4天；温度升高至29℃时，发育历期缩短至2-3天。幼若期在6-7月约为5-6天。所产卵中，受精的卵发育为雌虫，未受精的卵则发育为雄虫。

朱砂叶螨喜高温干旱环境，最适温度为2