细菌药敏试验及其耐药表型检测课件.pptVIP

第4章细菌药物敏感试验及其耐药表型检测

王辉北京大学医学部;抗菌药物敏感试验;药敏试验的意义;药敏试验;药敏试验折点的建立;MIC的分布;药代动力学和药效学;MIC与抑菌圈直径的线性关系;抑菌圈直径与MIC的关系;不同国家的判定折点

－可能不同;敏感性分类(CLSI的定义);敏感性分类（2）;药敏试验的方法学;将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。

抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关关系。;纸片扩散法;纸片扩散法;纸片扩散法;纸片扩散法－影响因素;纸片扩散法－标准化;CLSI的法规;常规测试并报告的药物分组(1);常规测试并报告的药物分组(2);常规测试并报告的药物分组(3);预报用药(一);预报用药(二);以一定浓度的抗菌药物与含有被试菌株的培养基进行一系列不同倍数稀释（通常为双倍稀释），经培养后观察其最低抑菌浓度。

稀释法中用琼脂培养基者为琼脂稀释法，用肉汤培养基者为肉汤稀释法。;常用抗菌药物容积稀释法;抗菌药物的稀释和融解;肉汤稀释法;肉汤稀释法;琼脂稀释法;琼脂稀释法;E试条是一条5mm×50mm的无孔试剂载体，一面固定有一系列预先制备的，浓度呈连续指数增长稀释抗菌药物，另一面有读数和判别的刻度；

抗菌药物的梯度可覆盖有20个MIC对倍稀释浓度的宽度范围；

将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上，经孵育过夜，围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈，圈的边缘与试条交点的刻度浓度即为抗菌药物抑制细菌的最小抑菌浓度。;;菌液制备及接种均同纸片扩散法。

90mm平板上可放E试验试条1～2条，140mm平板最多可放6条。

孵育温度及时间同纸片扩散法。;优点

连续浓度梯度，与琼脂稀释法相关性好

影响因素少，稳定性高

操作简单，省时

缺点：昂贵

用途：快生长菌，苛养菌，厌氧菌，酵母菌，

分枝杆菌;评价药物体外抗菌活性的指标;细菌耐药机制

;Β-内酰胺酶;

葡萄球菌属–青??素

;诱导β-内酰胺酶的检测;诱导β-内酰胺酶试验;超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;AmpC酶的特征;AmpC酶的检测方法;碳青霉烯酶;碳青霉烯酶;碳青霉烯酶表型检测方法-改良hodge试验;改良hodge试验的结果判读;金属酶表型检测方法：EDTA协同试验;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）携带SCCmec基因盒。SCCmec基因盒中的MecA基因编码修饰的青霉素结合蛋白PBP2a，这种蛋白对甲氧西林和其他的β-内酰胺类抗生素亲和力下降，从而导致对这些抗生素的耐药。

SCCmec主要由mec复合物和ccr复合物两部分组成。根据不同mec复合物和ccr复合物的组合，可以将SCCmec分成不同的型别，目前已发现8种SCCmec型。;SCCmec基因盒;耐甲氧西林葡萄球菌的检测;甲氧西林耐药的葡萄球菌（MRS）;凝固酶阴性葡萄球菌中苯唑西林MIC结果的报告策略*;克林霉素诱导耐药试验;克林霉素诱导耐药葡萄球菌;机制;诱导性克林霉素耐药（erm介导）;葡萄球菌诱导性克林霉素耐药的MIC检测方法;对于红霉素耐药，克林霉素敏感的葡萄球菌，需检测诱导性克林霉素耐药;万古霉素中介耐药的金黄色葡萄球菌（VISA）;MRSA(notVISA);当有以下一个或多个情况时菌株可疑为VISA;万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌（VRSA）;

vanA从VRE转至金葡菌;纸片扩散法折点

葡萄球菌-万古霉素;肠球菌高水平氨基糖苷类耐药筛查;肠球菌氨基糖苷类修饰酶;万古霉素耐药肠球菌（VRE）表型;VRE;快速MGP实验，孵育3-5小时；甲基化-a-D-葡糖苷酸化＝黄色;肺炎链球菌新的青霉素折点(μg/ml);肺炎链球菌

纸片扩散法-使用苯唑西林纸片作为青霉素敏感性的替代纸片;肺炎链球菌

苯唑西林纸片法用于测定青霉素的敏感性;谢谢大家！