二茂铁衍生肽的合成、表征及对β-淀粉样蛋白作用机制研究.docxVIP

二茂铁衍生肽的合成、表征及对β-淀粉样蛋白作用机制研究

一、引言

1.1研究背景与意义

阿尔茨海默病（Alzheimersdisease，AD）作为一种复杂的神经退行性疾病，主要影响老年人，其发病率随年龄增长而显著增加。据《世界阿尔茨海默病2018年报告》显示，每3秒钟，全球就会新增一位痴呆症患者，其中约60%-70%患有阿尔茨海默病，我国目前约有1000万阿尔茨海默病患者。随着全球人口老龄化的加剧，AD的患病人数呈逐年上升趋势，给家庭、社会和医疗系统带来了沉重的负担。

AD的主要病理特征包括大脑中β-淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）的异常聚集形成的淀粉样斑块、tau蛋白的过度磷酸化导致的神经原纤维缠结、神经元丢失以及神经炎症等。其中，Aβ的异常聚集被认为是AD发病机制中的核心事件，在AD的发生和发展过程中起着关键作用。Aβ是由淀粉样前体蛋白（APP）经过β-分泌酶和γ-分泌酶的依次切割产生的，其主要存在形式包括Aβ40和Aβ42，其中Aβ42由于其C末端具有更强的疏水性，更容易聚集形成寡聚体和纤维状沉淀，具有更高的神经毒性。在正常生理状态下，大脑内的Aβ可以通过多种途径进行清除，维持其动态平衡。然而，在AD患者中，Aβ的产生和清除机制失衡，导致Aβ在大脑中逐渐积累。Aβ寡聚体和纤维能够破坏神经元之间的突触连接，干扰神经信号传递，引发氧化应激和炎症反应，最终导致神经元死亡和认知功能障碍。研究表明，Aβ在脑内沉积的程度与AD疾病的严重程度密切相关，因此，深入研究Aβ的聚集机制以及寻找能够有效干预Aβ聚集的方法，对于理解AD的发病机制和开发治疗AD的药物具有重要意义。

二茂铁衍生肽是一类含有二茂铁基团的肽分子，近年来在生物医学领域展现出了巨大的研究潜力。二茂铁具有独特的夹心结构和良好的化学稳定性，其中心铁原子的氧化还原活性使得二茂铁衍生肽具有显著的抗氧化和抗炎作用。有研究表明，二茂铁衍生肽可以通过其二茂铁基团与氧自由基结合，并进一步对氧自由基进行电子转移，从而发挥抗氧化作用，减少氧化应激对神经元的损伤。此外，二茂铁衍生肽还能通过抑制促炎基因的表达来发挥其抗炎作用，减轻神经炎症对大脑的损害。同时，肽类化合物由于其良好的生物相容性、生物活性和选择性，能够特异性地与靶标分子相互作用，在疾病治疗中具有独特的优势。将二茂铁基团引入肽分子中，不仅可以赋予肽类化合物新的功能，还可以通过调整肽链的氨基酸序列和二茂铁基团的连接方式，对二茂铁衍生肽的结构和性能进行优化，使其更有效地作用于AD相关的病理靶点。

本研究致力于合成二茂铁衍生肽，并对其进行全面的表征，深入探究其与β-淀粉样蛋白的相互作用。通过研究二茂铁衍生肽与Aβ的结合模式、结合亲和力以及对Aβ聚集和神经细胞毒性的影响，有望揭示二茂铁衍生肽干预AD病理过程的分子机制，为开发新型的抗AD药物提供理论依据和实验基础。这不仅有助于加深我们对AD发病机制的理解，还可能为AD的治疗开辟新的途径，具有重要的科学意义和临床应用价值。

1.2国内外研究现状

在二茂铁衍生肽的合成方面，目前主要有固相合成法和液相合成法。固相合成法（SPPS）因其操作简便、易于自动化，能够实现肽链的快速合成与修饰，在实验室研究和工业生产中得到了广泛应用。如通过基于Fmoc化学的固相合成技术，能够在固相芯片上精准引入二茂铁侧链，并依次引入其他氨基酸侧链，同时去除Fmoc保护基，从而高效合成二茂铁衍生肽。而液相合成法则具有反应条件温和、副反应较少的优点，在合成一些对反应条件较为敏感的二茂铁衍生肽时具有独特优势。中南大学的程明以二茂铁为起始原料，采用液相合成法得到了二茂铁-三肽（Boc-Gly-Pro-Arg(NO?)-Fc-COOMe，GPR-Fca，总收率为7.25％）和二茂铁-五肽（Fc-Leu-Pro-Phe-Phe-Asp(OMe)-OMe，Fc-iAβ35，总收率为17.86％）。

在二茂铁衍生肽的表征技术上，常用的手段包括核磁共振（NMR）、红外光谱（IR）、质谱（MS）、高效液相色谱（HPLC）和圆二色谱（CD）等。NMR可精确确定分子结构和化学位移，为二茂铁衍生肽的结构解析提供关键信息；IR能够显示分子中的化学键和官能团，有助于判断二茂铁基团与肽链的连接方式及肽链的二级结构特征；MS可准确测定分子量及分子式，是鉴定合成产物的重要依据；HPLC则用于分析样品的纯度和含量，确保合成产物的质量；CD谱能够进一步确认肽的二级结构和螺旋含量，对于研究二茂铁衍生肽的空间构象具有重要意义。

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