第三次实验血清总脂含量测定2013111.ppt

实验报告问题;pH对酶活力的影响;温度对酶活力的影响;激活剂和抑制剂对酶活性的影响;6、高温对结果的影响

淀粉的结构：天然的淀粉有直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉的二级结构（指多糖链的折叠方式）是一个左手螺旋，每圈螺旋含6个残基，螺距0.8nm，直径1.4nm。

淀粉的螺旋结构并不十分稳定。当不与其他分子如碘相互作用时，直链淀粉很可能是以无规卷曲形式存在。碘分子正好能嵌入螺旋中心空道，每圈可容纳一个碘分子（I2），通过朝向圈内的羟基氧（提供未共享电子对）和碘（提供空轨道）之间的相互作用形成稳定的深蓝色淀粉和碘络合物。产生特征性的蓝色需要约36个即6圈的葡萄糖残基。(见书81页)

支链淀粉螺旋（约25-30个残基）中的短串碘分子比直链淀粉螺旋中的长串碘分子吸收更短波长的光，因此支链淀粉遇碘呈紫色到紫红色。

;;实验过程中的问题：

1、协作实验、合理分工

2、损坏物品登记及处理

3、移液器使用：用完后调到量程的最大值，按组放好。

4、试管、试剂瓶清洗

5、实验结束后：检查移液器数量、装配枪头、整理桌面及试剂，试管、三角瓶等洗净后按规格分装及白瓷盘中烘干，擦净桌面及试剂架，老师或研究生检查后才能离开。

6、值日生按值日表执行，负责打扫及协助试剂的分装等工作。

7、预习报告抽检：老师随机抽查并记分。

8、实验报告写明姓名、班级、学号，学委按序排列后在实验结束后的第三天上交。;实验五血清总脂含量测定

（香草醛法）;一、实验目的

掌握香草醛法测定总脂的原理和方法。;二、实验原理;红色的醌化合物;香草醛法

优点：

（1）采用胆固醇（或橄榄油）作标准的测定法，结果比较接近实际情况。

（2）方法简易，常用方法。

缺点：不能准确测定总脂含量。

（不饱和脂类比饱和脂类呈色强。血清中饱和脂类

与不饱和脂类的比例约为3：7。要测定血清的标

准总脂含量最好选用称量法。）;三、仪器、材料和试剂;四、操作步骤;2、计算;五、注意事项;六、思考题;实验七维生素C的提取和定量测定

——2,6-二氯酚靛酚法;一、实验目的;（一）维生素C简介;2、维生素C对人体健康的重要作用;3、维生素C的化学性质;又具有烯醇式结构,还原性强

水溶液中可解离成氧化型抗坏血酸

;（二）2，6-二氯酚靛酚（DCIP）滴定法;如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。

本实验A、B瓶的目的在于去除非维生素C的还原性物质的干扰

;利用碘酸钾做氧化剂。即在一定量的盐酸酸性试液中加碘化钾—淀粉指示剂，用已知浓度的碘酸钾滴定。当碘酸钾滴入后即释放出游离的碘，此碘被维生素C还原，直至维生素C完全氧化后，再滴以碘酸钾液时，释放出的碘因无维生素C的作用，可使淀粉指示剂呈蓝色，即为中点，其反应如下：

?????KIO3+5KI+6HCl→6KCl+3H2O+3I2;三、仪器、材料和试剂;四、操作步骤;3、样品及标准维生素C的滴定（2,6-二氯酚靛酚法，三角瓶滴定）

A瓶（样品提取液滴定）：

样品提取液10mL，用微量滴定管以2,6-二氯酚靛酚钠溶液进行滴定，每滴1滴即充分摇匀，滴至出现粉红色并保持30s不退色为止，记下滴定用量V1。

B瓶（样品处理液滴定）：

样品提取液10mL+1mL甲醛醋酸缓冲液，充分混匀后放置10min，以2,6-二氯酚靛酚钠溶液进行滴定，记下滴定用量V2。

C瓶（标准维生素C溶液滴定）：

标准维生素C溶液1mL+9mL2%醋酸缓冲液，充分混匀，以2,6-二氯酚靛酚钠溶液进行滴定，记下滴定用量V3。

(1mL2,6-二氯酚靛酚所能氧化的维生素C的毫克数)C=C0/V3;4、计算;五、注意事项;谢谢大家！