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微生物工程复习试卷及答案

考试时间：______分钟总分：______分姓名：______

一、选择题（每题2分，共20分）

1.下列微生物菌种选育方法中，属于诱变育种的是（）

A.自然选育

B.原生质体融合

C.紫外线诱变

D.基因工程改造

2.培养基湿热灭菌的原理是利用（）

A.干热空气

B.饱和蒸汽潜热

C.辐射灭菌

D.化学消毒剂

3.发酵过程中，比生长速率（μ）的定义是（）

A.菌体浓度随时间的变化率

B.单位时间内菌体浓度的自然对数增量

C.菌体质量与培养基体积的比值

D.限制性底物浓度与菌体浓度的比值

4.下列属于菌种保藏中低温干燥法的是（）

A.液氮超低温保藏

B.沙土管保藏

C.石蜡油封存保藏

D.冷冻干燥保藏

5.发酵罐溶氧系数（KLa）主要受（）影响

A.搅拌转速

B.通气量

C.培养基黏度

D.温度

E.以上全是

6.代谢控制发酵中，解除产物反馈阻遏的常用方法是（）

A.添加终产物类似物

B筛选营养缺陷型菌株

C.提高发酵温度

D.增加接种量

7.下游分离技术中，根据分子大小差异进行分离的是（）

A.萃取

B.超滤

C.离子交换层析

D.结晶

8.青霉素发酵生产中，属于前体物质的是（）

A.葡萄糖

B.玉米浆

C.苯乙酸

D.碳酸钙

9.下列关于固定化细胞的描述，正确的是（）

A.细胞完全失去活性

B.只能用于好氧发酵

C.可反复使用且稳定性高

D.适用于所有微生物

10.发酵过程染菌后，最直接的处理措施是（）

A.继续发酵观察

B.立即终止灭菌并排料

C.添加抗生素抑制杂菌

D.调整pH值抑制杂菌

二、填空题（每空1分，共15分）

1.微生物工程菌种选育的三大经典方法是自然选育、________和________。

2.培养基灭菌的D值是指在一定温度下，杀死________微生物所需的时间。

3.发酵动力学中，Monod方程描述了________与限制性底物浓度的关系。

4.菌种保藏中，斜面保藏法适用于短期保藏，保藏温度一般为________。

5.发酵过程中，溶氧浓度低于________时，菌体呼吸会受到抑制。

6.酶制剂生产中，诱导酶的合成需要添加________。

7.下游分离中，沉淀法根据原理可分为盐析沉淀、________和等电点沉淀。

8.基因工程菌构建中，常用的载体包括质粒、________和病毒载体。

9.发酵罐搅拌的作用包括混合、________和________。

10.氨基酸发酵中，通过控制________含量可解除生物素对谷氨酸合成的反馈抑制。

三、名词解释（每题3分，共15分）

1.临界溶氧浓度

2.代谢控制发酵

3.固定化细胞技术

4.发酵染菌

5.下游加工过程

四、简答题（每题5分，共30分）

1.简述微生物培养基设计的基本原则。

2.比较湿热灭菌与干热灭菌的优缺点及适用范围。

3.列举三种菌种保藏方法并说明其适用对象。

4.发酵过程中pH值异常波动的可能原因及调控措施。

5.简述酶制剂生产的工艺流程。

6.如何通过优化发酵参数提高产物得率？

五、论述题（每题6分，共12分）

1.详细论述基因工程菌构建的主要步骤及关键注意事项。

2.结合实例说明发酵过程优化的主要策略及其应用效果。

六、案例分析题（8分）

某抗生素生产企业采用50m3发酵罐进行青霉素生产，近期发酵周期结束后，产物效价较正常值下降30%，且发酵液出现异常浑浊。请分析可能的原因并提出改进措施。

试卷答案

一、选择题

1.C（紫外线诱变属于诱变育种；A为自然选育，B为原生质体融合，D为基因工程育种）

2.B（湿热灭菌利用饱和蒸汽潜热；A为干热灭菌，C为辐射灭菌，D为化学灭菌）

3.B（比生长速率μ=ln(X?/X?)/(t?-t?)，即单位时间内菌体浓度自然对数增量；A为菌体浓度变化率，C为菌体密度，D为底物与菌体浓度比）

4.D（冷冻干燥