生化实验-血糖的测定.pptVIP

血糖的测定;正常人空腹血糖浓度是多少？

为何能保持恒定？

糖尿病

;正常人空腹血糖浓度(fastingplasmaglucose,FPG)为3.89-6.11mmol/L。;血糖如何维持稳定？关键酶调节关键酶如何调节：激素调节。

常见的升高血糖的激素：胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。

降低血糖的激素：胰岛素

;对糖代谢的调节：胰岛素促进组织、细胞对葡萄糖的摄取和利用，加速葡萄糖合成为糖原，贮存于肝和肌肉中，并抑制糖异生，促进葡萄糖转变为脂肪酸，贮存于脂肪组织，导致血糖水平下降。胰岛素缺乏时，血糖浓度升高，如超过肾糖阈，尿中将出现糖，引起糖尿病。;6;如果调节失衡，结果是什么？高血糖或者低血糖。

低血糖：生理性和病理性。低于2.8mmol/L。;糖尿病（diabetes）是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征，临床上以高血糖为主要特点，典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现，即“三多一少”症状，糖尿病（血糖）一旦控制不好会引发并发症，导致肾、眼、足等部位的衰竭病变，且无法治愈。;糖尿病的类型;10;11;12;实验前三天，受试者每日食物中糖含量不应低于150g，且维持正常活动，影响试验的药物应在三天前停用，受试前应空腹10-15h。

空腹取血后，5分钟内饮入250ml含75g无水葡萄糖的糖水，妊娠妇女用量为100g，儿童按1.75g/kg体重给予,不超过75g。

服糖后半小时，1小时，2小时，3小时各抽血一次，作血糖定量检测。于采血同时，每隔1小时留取尿液作尿糖试验，整个过程不可吸烟，喝咖啡，喝茶或进食。;测试前禁食10-16小时，清晨空腹进行。空腹抽静脉血，测空腹静脉血浆葡萄糖，然后成人口服75g无水葡萄糖，溶于250ml水中，5~10分钟内饮完。饮后2小时抽静脉血，测静脉血浆葡萄糖。;IFG与IGT;无糖尿病史，空腹或者随机血糖异常

无糖尿病史，有一过性或持续性糖尿

无糖尿病史，有明显糖尿病家族史

有糖尿病症状，但空腹或者随机血糖不够标准

分娩巨大胎儿的妇女和有巨大胎儿史的个体

不明原因肾病和视网膜病

妊娠期、甲亢、感染期出现糖尿者;血糖测定方法;原理葡萄糖在和碱性铜试剂混合加热后，可使Cu2+还原成Cu+，后者与磷钼酸试剂作用生成蓝色的钼蓝。通过比色法测定蓝色化合物，计算出血糖的含量

稳定、准确、但对葡萄糖无特异性，受血中非糖还原物质的影响。

空腹正常血糖参考值

4.4~6.7mmol/L或80-120mg/dL;有机化学法：邻甲苯胺法;酶法：己糖激酶法（Hexokinase,HK）

;酶法：葡萄糖氧化酶法（glucoseoxidase,GOD）

;葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法原理;实验试剂;实验操作;葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液的葡萄糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含量。这是因为尿液中的尿酸等干扰物质浓度过高，可干扰过氧化物酶反应，造成结果假性偏低。

对于血液样品需及时分离红细胞。因为红细胞的酵解将会导致测定结果偏低。建议测定样品以草酸钾-氟化钠为抗凝剂以抑制糖酵解。;严重黄疸、溶血及乳糜样血清先制备无蛋白血滤液，然后在进行测定。

酶酚混合液一般现用现配。

葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异，溶液中的葡萄糖约36%为α型，64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。葡萄糖变旋酶，可加速这一反应，延长孵育时间可达到完成自发变旋过程。新配制的葡萄糖标准液主要是α型，故须放置2h以上(最好过夜)，待变旋平衡后方可应用。;计算：;不同检测方法所提供的空腹正常血糖参考值存在差异。

葡萄糖氧化酶法：3.9~6.1mmol/L

Folin-Wu法：4.4~6.7mmol/L

邻-甲苯胺法：3.9~6.1mmol/L;本法测定葡萄糖非常特异，从原理反应式中可知第一步是特异反应，第二步特异性较差。误差往往发生在反应的第二步。一些还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素和谷胱甘肽等，可与色原性物质竞争过氧化氢，从而消耗反应过程中所产生的过氧化氢，产生竞争性抑制，使测定结果偏低。但是对测定结果无显著影响。;葡萄糖氧化酶法：该法特异性高，反应条件温和，能反映血中葡萄糖的真实含量，且已推广出试剂盒，广泛应用与临床。

Folin-Wu法：该法对葡萄糖无特异性，一切还原物质均可产生同样的反应。虽血液中葡萄糖为主要还原物质，但仍存在其他非糖还原物质，故该法其参考值较其他方法略高。

邻-甲苯胺法：该法涉及强酸、加热等反应条件，不便于大规模检测，且邻甲苯胺须蒸馏后使用，有毒性，临床