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2026年pcr培训结业考试试题及答案

考试时长：120分钟满分：100分

试卷名称：2026年PCR培训结业考试试题

考核对象：PCR技术培训学员

题型分值分布：

-判断题（10题，每题2分）总分20分

-单选题（10题，每题2分）总分20分

-多选题（10题，每题2分）总分20分

-案例分析（3题，每题6分）总分18分

-论述题（2题，每题11分）总分22分

总分：100分

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一、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR技术只能扩增DNA片段，不能用于RNA的扩增。

2.引物设计时，最佳退火温度应选择Tm值最高的引物。

3.PCR产物凝胶电泳时，DNA片段越大，迁移速度越快。

4.DMSO可以提高PCR反应的特异性。

5.PCR过程中，Mg2?浓度过高会导致非特异性扩增增加。

6.热启动PCR可以减少非特异性扩增。

7.PCR产物可以通过限制性内切酶进行克隆。

8.巢式PCR可以提高检测灵敏度，但会增加假阳性率。

9.SYBRGreenI染料可以用于实时荧光定量PCR。

10.PCR反应体系中，dNTPs的浓度应保持一致。

二、单选题（每题2分，共20分）

1.下列哪种酶是PCR反应的引物延伸酶？（）

A.DNA聚合酶I

B.DNA聚合酶III

C.TaqDNA聚合酶

D.RNA聚合酶

2.PCR反应体系中，哪个组分用于提供能量？（）

A.引物

B.dNTPs

C.DNA聚合酶

D.Mg2?

3.下列哪种方法可以用于PCR产物的大小鉴定？（）

A.毛细管电泳

B.沉淀法

C.薄层色谱

D.紫外分光光度计

4.PCR反应中，引物二聚体形成的最常见原因是？（）

A.引物设计不合理

B.Mg2?浓度过高

C.退火温度过低

D.以上都是

5.下列哪种试剂可以用于PCR产物的纯化？（）

A.乙醇

B.异丙醇

C.氯仿

D.以上都是

6.实时荧光定量PCR中，常用的荧光报告基团是？（）

A.FAM

B.Cy5

C.TexasRed

D.FITC

7.下列哪种方法可以用于PCR产物的测序？（）

A.Sanger测序

B.基因芯片

C.质谱分析

D.毛细管电泳

8.PCR反应中，引物退火温度通常在哪个范围？（）

A.25-35℃

B.35-55℃

C.55-75℃

D.75-95℃

9.下列哪种试剂可以用于PCR反应的终止？（）

A.EDTA

B.甘油

C.异丙醇

D.NaOH

10.PCR反应体系中，引物浓度通常为多少？（）

A.0.1-1μM

B.1-10μM

C.10-100μM

D.100-1000μM

三、多选题（每题2分，共20分）

1.PCR反应体系中，哪些组分是必需的？（）

A.模板DNA

B.引物

C.dNTPs

D.DNA聚合酶

E.Mg2?

2.下列哪些因素会影响PCR反应的特异性？（）

A.引物设计

B.退火温度

C.Mg2?浓度

D.dNTPs浓度

E.DNA聚合酶种类

3.下列哪些方法可以用于PCR产物的克隆？（）

A.T-A克隆

B.PCR直接克隆

C.原位克隆

D.Gateway克隆

E.GoldenGate克隆

4.下列哪些试剂可以用于PCR反应的优化？（）

A.DMSO

B.甘油

C.脱氧核苷酸

D.聚乙二醇

E.硫酸铵

5.实时荧光定量PCR中，哪些参数可以用于评估扩增效率？（）

A.Cq值

B.R2值

C.相对定量

D.绝对定量

E.灵敏度

6.下列哪些方法可以用于PCR产物的检测？（）