「ELISA问诊室」唾液、尿液、土壤等特殊样本有哪些处理技巧呢？一文概述11种样本的处理方法！.pdfVIP

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「ELISA问诊室」唾液、尿液、土壤等特

殊样本有哪些处理技巧呢？一文概述11

种样本的处理方法！

ELISA作为一种快速、灵敏且准确的检测方法，其应用范围广泛，

涵盖了从常规的血液、组织匀浆、细胞培养上清液到细胞裂解液

等多种样本。此外，ELISA还能处理一些特殊样本，如分泌物（唾

液、乳汁）、排泄物（尿液、大便）甚至土壤等。由于不同类型

样本的处理方法存在显著差异，因此正确处理这些样本对于确保

ELISA实验的准确性至关重要。

在之前的文章中，我们已经详细介绍了血液、细胞和组织样本的

处理方法。接下来，我们将重点介绍几种特殊类型样本的处理技

巧，以供参考。

1.唾液样本处理

唾液样本的收集应选择新鲜样本，受试者在采集前1小时内应避免进

食、抽烟或饮用饮料。建议使用盐水漱口后，让唾液自然流出，用无

菌管收集未刺激的唾液2-5mL。随后，立即在4℃条件下以4000rpm

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的速度离心15分钟，以去除任何颗粒或沉积物。取上清进行检测，

剩余上清可分装后保存于-80℃。

2.痰液样本处理

痰液样本通常选择清晨起床后未刷牙或吃饭前的样本。建议使用生理

盐水或清水漱口，确保痰量达到1mL以上（约1元硬币大小），并避

免与鼻涕、唾液等混合。选择痰液中较为粘稠的部分称重，加入2倍

体积的0.1%DTT（二硫苏糖醇）溶解粘液，反复吹打，涡旋震荡15-30

秒。随后，加入2倍于痰量的PBS缓冲液，振荡混匀15-20分钟。在

4℃条件下，以1500rpm离心10分钟，吸取上清进行检测或保存。

3.尿液样本处理

用无菌容器收集当天初次中段尿液。4℃，2000-3000rpm离心20分

钟，收集上清进行检测或-80℃保存。

4.脑脊液样本处理

临床上人脑脊液的抽取采用腰椎穿刺法。实验动物如小鼠的脑脊液量

较少，通常仅有几微升，可以针头插入枕骨打孔进行抽取，当出现红

色液体时说明脑脊液已经抽完。样品收集后，4℃，2000-3000rpm

离心20分钟，收集上清进行检测或-80℃保存。

胸腹水、关节积液可参考此方法。

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5.肺泡灌洗液样本处理

在纤维支气管镜下，按照常规方法进行支气管肺泡灌洗。每次注入无

菌生理盐水20mL，然后缓慢洗出。回收肺泡灌洗液，4℃，2000-3000

rpm离心10分钟，收集上清进行检测或-80℃保存。

6.乳汁样本处理

收集样品，4℃，2000-3000rpm离心15分钟，收取上清。重复离心

3次，取上清进行检测或-80℃保存。

7.粪便样本处理

尽量采集干的粪便，重量应大于50mg。将粪便用PBS洗3次，一般

情况下每克粪便中加入9mLPBS缓冲液。超声破碎，功率150-300W，

裂解1-2s，间歇20-30s，3-5个循环。然后5000×g离心10分钟，

取上清检测，或分装冻存于-20℃或-80℃备用。

8.精液样本处理

收集精液后需在室温或37℃条件下，用纤维蛋白溶解酶进行处理。

之后将精液于4℃，4000rpm离心10分钟分离精浆，进行检测，或

分装冻存于-20℃或-80℃备用。

9.蛋黄样本处理

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取新鲜蛋黄用超纯水稀释10倍。用盐酸调pH至5.0-5.2，4℃静置6

小时，然后10000rpm离心10分钟，收集上清。再调pH至7.2-7.4，

进行检测，或分装冻存于-20℃或-80℃备用。

10.土壤样本处理

取1g土壤，加入9mL的PBS（pH7.3），充分混匀。4℃，5000-36000

rpm离心5分钟，收取上清。

11.植物样本样本处理

取新鲜植物组织在液氮中研磨。加