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选修3问题归纳

专题1:基因工程

1、DＮA重组技术得基本工具:限制性核酸内切酶（限制酶),DNA连接酶，运载体。

２、基因工程中用到得酶,及其作用:

限制酶：切割ＤNA。

DNA连接酶：把ＤNA片段拼接成新得DNA。

3、基因体现载体得构成：目得基因,开启子，终结子，标记基因。

4、开启子得作用:驱动目得基因转录出mRＮＡ,最终取得所需蛋白质。

5、终结子得作用：终结mＲＮＡ得转录。

6、标记基因得作用：为了判别受体细胞中就是否含有目得基因，从而将含有目得基因得细胞筛选出来。

７、基因工程得变异原理：基因重组。

８、DＮA分子杂交技术得原理：碱基互补配对原则。

9、PＣR技术得原理:DＮA双链复制得原理(碱基互补配对）。

10、获取目得基因得方法：①从基因文库中获取。②运用ＰCR技术扩增。③运用化学方法人工合成。

11、将目得基因导入植物细胞得方法:①农杆菌转化法。②基因枪法。③花粉管通道法。

12、将目得基因导入动物细胞得方法:显微注射技术。

13、将目得基因导入微生物细胞得方法:用Ca2+

14、检测目得基因就是否插入受体细胞得方法：ＤNA分子杂交技术。

１5、检测就是否转录出mＲNA得方法:分子杂交技术。

１6、检测就是否翻译出蛋白质得方法：抗原—抗体杂交。

17、基因工程常用得载体有哪些:质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒

18、培育转基因植物常用什么细胞做受体细胞:受精卵或体细胞。

19、培育转基因动物常用得细胞:受精卵

20、基因工程制药常用得受体细胞:微生物细胞

2１、基因工程得载体必须具备得条件：

①可以在宿主细胞中复制并稳定地保存；

②具备一至多个限制酶切点,以便与外源基因连接

③具备某些标记基因，供重组DＮA得鉴定与选择。

④对受体细胞无害

⑤载体DNＡ分子大小应适宜，以便提取与在体外进行操作

22、基因工程操作得关键环节:基因体现载体得构建

23、构建基因体现载体得目得：

①使目得基因在受体细胞中稳定遗传,而且可以遗传下一代。

②使目得基因可以体现与发挥作用。

24、目得基因能否在真核生物中稳定遗传得关键：转基因生物得DNA上就是否插入了目得基因。

２5、Ti质粒上得T—ＤNA得特点：

Tｉ质粒上得T—DＮＡ（可转移得DＮA)可转移至受体细胞而且整合到受体细胞染色体得DＮA上。

２6、农杆菌转化法中构建基因体现载体时目得基因插入得部位：Ｔi质粒上得T—DNA上

专题２:细胞工程

1、细胞工程中用到得酶,及其作用:

纤维素酶，果胶酶:用于植物体细胞杂交技术中去除植物细胞壁。

胰蛋白酶:用于动物细胞培养技术中使剪碎得组织分散成单个细胞,与解除原代培养中细胞贴壁与接触抑制现象。

2、植物组织培养技术得原理:植物细胞得全能性。

3、植物体细胞杂交技术得原理:①植物细胞具备全能性。②细胞膜具备流动性。

４、动物细胞培养得原理：细胞增殖。

５、动物细胞融合技术得原理：细胞膜具备流动性。

6、动物（体）细胞核移植得原理：动物细胞核得全能性。

７、去除细胞壁（取得原生质体)得方法：运用纤维素酶,果胶酶去除细胞壁。

8、诱导植物原生质体融合得方法:

物理法：离心、振动、电击等。

化学法:聚乙二醇（ＰEG)诱导。

9、培育无病毒植株得方法：

植物组织培养（选取植物分生区附近（如茎尖）得细胞进行组织培养，取得脱毒苗。）

１0、制造人工种子得方法:植物组织培养（以植物组织培养得到得胚状体、不定芽、顶芽与腋芽等为材料,经人工薄膜包裹得到得种子。)

11、将动物细胞分散成单个细胞得方法：从健康动物体内取出组织块,剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶解决一段时间，使组织分散成单个细胞。

12、去除卵母细胞得细胞核得方法:经过显微操作取出卵母细胞得细胞核。

13、激活核移植得重组细胞使其分裂与发育得方法：用物理法或化学法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂与发育进程。

14、诱导动物细胞融合得方法：

物理法:离心、振动、电击等。

化学法:聚乙二醇(PＥG)诱导。

生物法：灭活得病毒

１5、老式生产抗体得方法:

向动物体内反复注射抗原,使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需得抗体。

16、制备单克隆抗体时筛选出杂交瘤细胞得方法：

用特定得选择性培养基进行筛选(在该培养基上只有融合得杂种细胞才能生长）。

１7、制备单克隆抗体时筛选出产生专一抗体得杂交瘤细胞得方法:

对经过选择性培养得杂交瘤细胞进行克隆化培养与抗体检测。

１8、大量培养杂交瘤细胞及取得单克隆抗体得方法:

①在体外条件下做大规模培养,在培养液中取得单克隆抗体。

②注射到小鼠体内增殖,在小鼠腹腔中提取单克隆抗体

19、卵母细胞采集得方法：

①对于实验动物(如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等):用促性腺激素解决,使其排出更多得卵子,然后从输卵管中冲