2026届高三生物一轮复习课件第42讲《基因工程的基本工具和基本操作程序》.pptxVIP

2026年·高考生物·一轮复习第十单元生物技术与工程第42讲基因工程

考点一重组DNA技术的基本工具1.基因工程的概念？基因工程：是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫重组DNA技术。1.操作环境：2.原理：3.操作对象：4.操作水平：5.结果：体外环境基因分子水平基因重组赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品定向改造生物性状；克服远缘杂交不亲和障碍6.意义：

考点一重组DNA技术的基本工具【思考】1:不同生物的基因为什么能拼接？为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达?①DNA的基本组成单位相同（四种脱氧核苷酸）；②都遵循碱基互补配对原则；③DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构①基因是控制生物性状的结构与功能单位；②遗传信息的传递都遵循中心法则；③生物界几乎共用一套遗传密码

考点一重组DNA技术的基本工具2.重组DNA技术的基本工具有哪些？①限制性内切核酸酶（限制酶）；②DNA连接酶；③载体原核生物数千特定核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端

考点一重组DNA技术的基本工具粘性末端平末端①黏性末端：限制酶在它识别序列的将DNA分子的两条链切开时，产生的是黏性末端。中轴线两侧分别②平末端：限制酶在它识别序列的切开时，产生的是平末端中轴线

限制酶如何选(1)不破坏目的基因原则：如图甲中可选择PstⅠ，而不选择SmaⅠ。(2)保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则：若载体上有两个及以上的标记基因，则可合理对其中一些标记基因进行酶切破坏，从而达到比一个标记基因更高的筛选成功率，防止只有一个标记基因时出现的“假阳性”（3）“双酶切”法优点：①防止目的基因环化；②避免目的基因与载体反向连接。（4）“同尾酶”：来源不同，但能产生相同黏性末端的限制酶。

用限制酶切割时需注意的事项(1)获取目的基因和切割载体时,通常使用同种限制酶,目的是。但是使用该法缺点是容易发生，为了避免上述情况发生，可采取的措施是。为了产生相同的黏性末端，便于连接分别使用两种限制酶去切割目的基因和载体目的基因、质粒的自身环化以及目的基因与质粒反向连接(2)获取一个目的基因需限制酶切割次,共产生个游离的磷酸基团。两(3)磷酸二酯键的形成脱去水分子（产生水），磷酸二酯键的断裂消耗水分子。不同的限制酶处理可以产生相同的黏性末端4

将从苏云金杆菌中获取的Bt基因转入棉花细胞内培育转基因抗虫棉的过程中，需借助多种分子工具且经历多个操作步骤。实验人员使用限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割质粒。如图表示常用的限制酶识别序列和切割位点以及质粒上的限制酶切割位点。请思考以下问题：(1)限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割产生的黏性末端分别是_______________和______________。(2)切割图示中的目的基因应选用哪类限制酶？请说明理由。用限制酶MunⅠ和SpeⅠ切割目的基因。限制酶MunⅠ和EcoRⅠ切割后形成的黏性末端相同，限制酶NheⅠ和SpeⅠ切割后形成的黏性末端相同，实验人员使用限制酶EcoRⅠ和NheⅠ切割质粒，应选用MunⅠ和SpeⅠ切割目的基因。

XhoⅠXbaⅠ

XbaⅠ

考点一重组DNA技术的基本工具②DNA连接酶作用：可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

考点一重组DNA技术的基本工具②DNA连接酶类型：类型E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶来源功能缝合和；缝合__________和_______________结果恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的_________________大肠杆菌T4噬菌体黏性末端黏性末端平末端(效率低)磷酸二酯键平末端（连接平末端效率远低于T4DNA连接酶）

项目DNA连接酶DNA聚合酶