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基于内皮—间质转化的心肌纤维化细胞模型构建及瓜蒌薤白白酒汤干预机制研究

一、引言

1.1研究背景与意义

心肌纤维化（MyocardialFibrosis，MF）是许多心血管疾病，如高血压、冠心病、心肌病等的主要病理基础，严重威胁人类健康。其特征为心肌细胞内的肌原纤维被胶原纤维替代，致使心脏结构和功能发生异常变化。随着病情发展，心肌纤维化会导致心脏舒张和收缩功能障碍，引发心律失常、心力衰竭，甚至心源性猝死，严重降低患者的生活质量和生存率。

内皮-间质转化（Endothelial-MesenchymalTransition，EndMT）在心肌纤维化的发生发展过程中起着关键作用。在正常生理状态下，EndMT主要存在于胚胎时期心脏的形成阶段，对心内膜形成心间质细胞，进而形成成人心脏的房室塾、原始瓣膜和心隔等结构至关重要，这一过程受转化生长因子β（TransformingGrowthFactor-β，TGF-β）和骨形态发生蛋白（BoneMorphogeneticProteins，BMPs）等多种因子的精密调控。然而，在病理状态下，如心肌缺血、炎症等刺激，会导致内皮细胞向间质细胞转化异常激活。此时，内皮细胞逐渐失去其典型的鹅卵石样形态特征，转变为梭形，并伸出伪足，同时内皮细胞特异性蛋白如血管内皮黏附分子1/CD31（PECAM-1/CD31）和血管钙黏蛋白（VE-Cadherin）表达下调，而间充质细胞特异性标志物如α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及成纤维细胞特异性蛋白1（FSP1）表达上调，细胞间连接减少。这些变化使得内皮细胞获得间质细胞的特性，促进了心肌成纤维细胞的增殖和活化，进而导致细胞外基质（ExtracellularMatrix，ECM）如胶原蛋白的大量合成和沉积，最终引发心肌纤维化。因此，深入研究EndMT在心肌纤维化中的作用机制，对于揭示心肌纤维化的发病机制和寻找有效的治疗靶点具有重要意义。

瓜蒌薤白白酒汤源自张仲景的《金匮要略》，是中医治疗胸痹的经典方剂，具有通阳散结、行气祛痰之功效。现代研究表明，该方在治疗冠心病、心绞痛、支气管哮喘、肺纤维化等心肺疾病方面具有显著疗效。其在心血管疾病治疗中展现出的良好效果，可能与调节心肌纤维化进程密切相关。瓜蒌薤白白酒汤由瓜蒌、薤白和白酒组成，其中瓜蒌富含三萜皂苷、有机酸等成分，具有抗氧化、抗炎和保护心肌细胞的作用；薤白含有大蒜辣素、甲基烯丙基三硫化合物等，可扩张冠状动脉、降低血脂和抑制血小板聚集；白酒则可通血脉、行药势，促进其他药物成分的吸收和发挥作用。这些成分相互协同，可能通过多种途径干预心肌纤维化过程，如抑制炎症反应、调节氧化应激、抑制成纤维细胞的增殖和活化等。然而，目前瓜蒌薤白白酒汤治疗心肌纤维化的具体作用机制尚未完全明确，仍有待深入研究。

本研究基于EndMT建立心肌纤维化细胞模型，为研究心肌纤维化的发病机制和药物干预提供了理想的实验平台。通过该模型，能够更深入地探究瓜蒌薤白白酒汤对心肌纤维化的影响及其作用机制，有助于揭示其治疗心肌纤维化的科学内涵，为临床应用提供坚实的理论依据和实验支持。此外，本研究还能为开发治疗心肌纤维化的新型药物提供思路和方法，推动中医药在心血管疾病治疗领域的发展，具有重要的理论意义和临床应用价值。

1.2研究目的与创新点

本研究旨在基于内皮-间质转化构建心肌纤维化细胞模型，并深入探究瓜蒌薤白白酒汤在该模型中的作用及其机制。具体而言，通过一系列实验操作，包括细胞培养、诱导剂刺激以及相关指标检测，成功建立稳定可靠的心肌纤维化细胞模型。在此基础上，运用该模型研究瓜蒌薤白白酒汤对心肌纤维化内皮-间质转化的影响，从细胞水平和分子水平观察其对相关标志物和信号通路的调节作用。同时，通过整体动物实验进一步验证瓜蒌薤白白酒汤抑制心肌纤维化内皮-间质转化的效果，明确其作用靶点和作用机制，为瓜蒌薤白白酒汤临床用于心肌纤维化的治疗提供有力的实验支持。

本研究的创新点主要体现在以下两个方面：一是在模型构建角度，不同于传统的单纯刺激成纤维细胞增殖来构建心肌纤维化细胞模型的方法，本研究基于内皮-间质转化，利用转化生长因子诱导冠状动脉内皮细胞向间质细胞转化并进一步增殖，该模型不仅更加符合心肌纤维化的实际发病过程，而且能够回答心肌成纤维细胞的来源和后期增殖这两个关键问题，为研究心肌纤维化的发病机制提供了更具创新性和科学性的实验模型；二是从中药复方研究角度，选择经典的瓜蒌薤白白酒汤作为研究对象，深入探究其对基于内皮-间质转化的心肌纤维化细胞模型的作用及机制，为揭示中药复方治疗心肌纤维化的科学内涵提供了新的研究思路和方法，有助于推动中医药在心血管疾病治疗领域的现代化研究和发展。

二、内皮—间质转