合成生物基因编辑效率评估师岗位招聘考试试卷及答案.docVIP

合成生物基因编辑效率评估师岗位招聘考试试卷及答案

一、填空题（每空1分，共10分）

1.CRISPR/Cas9系统中，引导Cas9蛋白切割靶DNA的关键元件是______。

2.检测DNA双链错配的常用核酸酶是______（或T7E1）。

3.基因编辑中，通过同源供体修复实现精准编辑的途径是______。

4.评估基因编辑脱靶效应的金标准技术之一是______。

5.荧光报告系统中，若靶位点编辑后导致荧光蛋白移码突变，可通过______变化反映编辑效率。

6.计算基因编辑效率时，通常以NGS测序中______占总有效reads的比例表示。

7.锌指核酸酶（ZFN）和TALEN均通过______结构域识别靶DNA序列。

8.常用于体内基因编辑的病毒载体是______（或慢病毒）。

9.影响sgRNA活性的核心因素是其与靶DNA的______及二级结构。

10.基因编辑效率评估中，需提取细胞的______作为检测模板。

答案：1.sgRNA；2.Surveyor；3.HDR（同源定向修复）；4.GUIDE-seq；5.荧光强度；6.编辑reads；7.特异性DNA结合；8.AAV（腺相关病毒）；9.互补性；10.基因组DNA

二、单项选择题（每题2分，共20分）

1.以下哪种方法可同时检测编辑效率和脱靶位点？

A.SurveyorassayB.T7E1assayC.NGSD.荧光报告系统

答案：C

2.CRISPR/Cas9编辑中，NHEJ途径的主要产物是：

A.精准插入B.缺失/插入（indel）C.同源重组D.基因敲入

答案：B

3.提升HDR效率的常用策略不包括：

A.加入ssODN供体B.抑制NHEJ途径C.延长sgRNA长度D.细胞周期同步化

答案：C

4.以下哪种载体更适合瞬时基因编辑？

A.质粒B.AAVC.慢病毒D.腺病毒

答案：A

5.sgRNA设计时，PAM序列通常位于靶序列的：

A.5’端B.3’端C.中间D.任意位置

答案：B

6.检测脱靶效应时，Digenome-seq的原理是：

A.识别错配DNAB.捕获整合的标签DNAC.全基因组测序分析D.荧光标记

答案：C

7.基因编辑效率评估中，以下哪种样本可直接检测蛋白水平变化？

A.基因组DNAB.RNAC.细胞裂解液D.培养基

答案：C

8.TALEN与CRISPR/Cas9相比，优势在于：

A.设计简单B.特异性更高C.效率更高D.成本更低

答案：B

9.细胞周期中，HDR效率最高的时期是：

A.G1期B.S期C.G2/M期D.G0期

答案：C

10.以下哪种情况会降低基因编辑效率？

A.高GC含量的sgRNAB.sgRNA无二级结构C.靶位点位于基因编码区D.脱靶位点多

答案：A

三、多项选择题（每题2分，共20分，多选或少选均不得分）

1.基因编辑效率评估的核心指标包括：

A.编辑效率B.特异性C.稳定性D.遗传毒性

答案：ABCD

2.常用的脱靶检测技术有：

A.GUIDE-seqB.Digenome-seqC.CIRCLE-seqD.ChIP-seq

答案：ABC

3.提升HDR效率的策略包括：

A.使用Cas9nickaseB.加入RAD51抑制剂C.细胞周期同步于S/G2期D.增加供体DNA浓度

答案：ACD

4.基因编辑载体的类型包括：

A.病毒载体（AAV、慢病毒）B.非病毒载体（质粒、脂质体）C.病毒样颗粒D.人工染色体

答案：ABCD

5.影响sgRNA活性的因素有：

A.GC含量（40%-60%为宜）B.靶位点的二级结构C.PAM序列类型D.sgRNA长度（18-22nt）

答案：ABCD

6.基因编辑效率的检测方法包括：

A.SurveyorassayB.T7E1assayC.NGSD.荧光报告系统

答案：ABCD

7.基因编辑后需评估的细胞表型指标有：

A.蛋白表达水平B.细胞生长速率C.荧光强度D.细胞存活率

答案：ABCD

8.CRISPR/Cas9系统的组成元件包括：

A.Cas9蛋白B.sgRNAC.PAM序列D.供体DNA（HDR时）

答案：ABCD

9.脱靶效应的潜在后果包括：

A.基因组不稳定B.细胞毒性C.表型异常D.遗传变异传递

答案：ABCD

10.基因编辑效率评估的样本类型包括：

A.基因组DNAB.RNAC.蛋白D.细胞

答案：ABCD

四、判断题（每题2分，共20分，正确打√，错误打×）

1.Surveyor酶可特异性切割错配的DNA双链。√

2.HDR效率通常高于NHEJ效率。×

3.sgRNA的最佳长度为20nt左右。√

4.GUIDE-seq是检测脱靶的金标准技术之一。√

5.AAV载体仅可用于体内基因编辑。×

6.NGS可同时定量编辑效率和检测脱靶位点。√

7.启动子强度不影响Cas9蛋白的表达