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实验一观测DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)

一．实验目标：初步掌握观测ＤＮA和ＲNA在细胞中分布的方法

二.实验原理：

１．甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNＡ的亲和力不一样,甲基绿使DNＡ展现绿色，吡罗红使RNＡ展现红色。运用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示ＤＮＡ和ＲNA在细胞中的分布。

2．盐酸可以变化细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞，同时使染色休中的DNＡ和蛋白质分离，有利于DNＡ与染色剂结合。

三．方法环节:

操作环节

注意问题

解释

取口腔上皮细胞制片

载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液

用消毒牙签在自已漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞

将载玻片在酒精灯下烘干

防止污迹干扰观测效果

保持细胞原有形态

消毒为防止感染，漱口防止取材失败

固定装片(细胞已死亡)

水解

将烘干的载玻片放入质量分数为８%的盐酸溶液中，用30０Ｃ水浴保温5ｍin

变化细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNＡ与蛋白质分离而被染色

冲冼涂片

用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S

洗去残留在外的盐酸

染色

滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5ｍin

?两种溶液混合,现配现用

观测

先低倍镜观测，选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调整清楚后才换用高倍物镜观测

使观测效果最正确

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实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)

一．实验目标：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的关于有机化合物,产生特定的颜色反映。

1.可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Ｃu2O沉淀。如:

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葡萄糖＋Cｕ（OH)2?葡萄糖酸＋Cu2Ｏ↓（砖红色）+H2Ｏ，即Cu(ＯＨ)2被还原成Ｃu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

２．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。淀粉遇碘变蓝色。

3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反映。(蛋白质分子中含有诸多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反映。)

三.实验材料

1.做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高,颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,易于观测。)

2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最正确,实验前通常要浸泡３~4小时(也可用蓖麻种子）。

3.做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

四、实验试剂

斐林试剂(包含甲液:质量浓度为0.1ｇ／ｍLNａＯH溶液和乙液：质量浓度为0．０５ｇ/mＬCuSＯ4溶液)、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂(包含A液:质量浓度为０.1g/ｍＬNaＯH溶液和B液:质量浓度为0．0１g/mLCuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。

五、方法环节:

（一）可溶性糖的鉴定

操作方法

注意问题

解释

１.制备组织样液。

(去皮、切块、研磨、过滤）

苹果或梨组织液必须暂时制备。

因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。

2.取１支试管，向试管内注入2mＬ组织样液。

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3．向试管内注入１mL新制的斐林试剂，振荡。

应将构成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；

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切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。

斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时,生成的Cu（OＨ)2在70~9０0C下分解成黑色CuO和水；

甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反映，无Ｃｕ(OH)2生成。

4.试管放在盛有５0－65０C温水的大烧杯中,加热约2分钟，观测到溶液颜色：浅蓝色→棕色

最正确用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。

防止试管内的溶液冲出试管，导致烫伤；

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模拟尿糖的检测

１、取样:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

２、检测方法:斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3、成果：(用斐林试剂检测)试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖,与斐林试剂发生反映产生砖红色沉淀,而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反映。

（二)脂肪的鉴定

操作方法

注意问题

解释

花生种子浸泡、去皮、切下某些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。

干种子要浸泡3~４小时，新花生的浸泡时间可缩短。

因为浸泡时间短，不易切片，浸泡