结合基因组探究三峡库区一株解钾菌的培养条件优化.pdfVIP

摘要

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钾是生物体生命活动所必须的营养元素。对植物来说，钾在增强酶活性、提高

光合作用效率以及提升抗逆性等方面具有重要作用。然而，土壤中的钾主要以矿

物形式存在，不能被植物直接吸收利用，土壤快速补钾主要依靠外界补充。但若

为了补钾而过量施用化肥反而会导致土壤结构恶化、盐碱化以及水体富营养化等

生态问题。因此，开发能够有效溶解矿物钾、提高土壤钾利用率的微生物资源对

于提高农业可持续性具有重要意义。

解钾微生物是一类能够促进矿物钾释放的土壤有益微生物，其主要通过分泌

有机酸、胞外多聚物和钾溶解相关酶类等方式溶解难溶性钾，提高土壤可利用钾

含量。近年来，解钾菌在生物钾肥研发中的应用前景广受关注。然而，不同解钾

菌在不同矿物钾底物上的溶解能力存在较大差异，其底物偏好性受菌种遗传背景、

代谢机制及培养条件等多种因素影响。因此，深入研究高效解钾菌的底物适应性

及其解钾机制，对于提高其农业应用效率至关重要。

三峡消落带因水位波动导致土壤速效钾流失严重。为了能够以绿色可持续的

方式为该区域土壤补钾，本研究从三峡库区土壤中分离出一株高效解钾菌，结合

其基因组探讨其底物偏好性，并通过优化培养条件提高其解钾能力，以期为生物

钾肥的开发提供科学依据。本研究得到了以下结果：

（1）本研究从三峡库区土壤样品中分离出多种土壤微生物，结合解钾透明圈

法和液体解钾培养基测定结果，筛选出一株解钾效率最高的细菌：高地芽孢杆菌

KB6。

（2）评估高地芽孢杆菌KB6解钾率与发酵液pH值，发现二者之间具有相关

性。借助HPLC测定发酵液中的有机酸，结果显示柠檬酸含量最高，在

303.64~387.53mg/L之间。柠檬酸是三羧酸循环的关键中间产物，推测三羧酸循环

产酸是高地芽孢杆菌KB6解钾机理的一种。

3KB6

（）通过分析高地芽孢杆菌基因组，筛选出编码蛋白酶和碳水化合物活

性酶的基因。结合多个组学数据库的注释信息，分析其底物特异性。推测该菌可

以有效利用外界环境中的氮源，但该菌对碳源的利用较差。

4KB6

（）采用单因素实验和正交实验相结合的方法，对地芽孢杆菌培养条件

进行优化，最终得到培养条件的最佳组合：0.3%酵母粉、2.0%淀粉、培养时间3

I

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天、培养温度35℃、接种量4%、初始pH值7。对这个最佳组合进行实验验证，

最终解钾率为34.8%。

关键词：解钾菌解钾机理三峡消落区基因组学培养条件优化

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Potassiumisanecessarynutrientelementforthelifeactivitiesoforganisms.For

plants,potassiumplaysanimportantroleinenhancingenzymeactivity,improving

photosynthesisefficiencyandimprovingstressresistance.However,thepotassiumin

thesoilmainlyexistsintheformofmineralsandcannotbedirectlyabsorbedand

utilizedbyplants,sothesoilrapidpotassiumsupplementismainlysupplementedbythe

outsideworld.However,excessiveapplicati